シュワン細胞脱分化機構の解明と未分化シュワン細胞誘導による末梢神経再生の研究

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09273
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 平川 明弘 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 特任准教授 (50422720)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 河村 真吾 岐阜大学, 医学部附属病院, 助教 (30456511) ; 秋山 治彦 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60402830)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 未分化Schwann細胞 / 末梢神経再生 / PI3K/Aktシグナル / Wnt /β-catenin シグナル

Outline of Annual Research Achievements

PI3K/Aktシグナルの関与を解析するため、Schwann 細胞特異的遺伝子改変マウス：Sox10-CreERT2マウスとPten flox（gain of function）マウス、Rosa26-stop-Pten（loss of function）マウス（2019年度先端モデル動物支援プラットフォーム採択に作製）を交配し、Sox10-CreERT2/Pten flox/floxおよび、Sox10-CreERT2/Rosa26-stop-Ptenを作製した。
同様にWnt/β-cateninシグナルの関与を解析するため、Sox10-CreERT2マウスとβ-catenin ex3 flox（gain of function）、 β-catenin ex2-6 floxマウス（loss of function）を交配し、Sox10-CreERT2/β-catenin ex3 flox 、Sox10-CreERT2/β-catenin ex2-6 flox/floxを作製した。
Sox10-CreERT2/Pten flox/floxマウスにタモキシフェンおよびcorn oil（コントロール）を投与後、坐骨神経損傷モデルを作製した。受傷後5日目で組織標本を作製し、分化シュワン細胞マーカー(Mbp)、未分化シュワン細胞マーカー（Ngfr）、軸索マーカー（TujI）による免疫染色を行った。その結果、シュワン細胞におけるPI3K/Aktシグナル亢進によって、シュワン細胞の脱分化が遅延することが示唆された。
現在、Sox10-CreERT2/Rosa26-stop-Pten、Sox10-CreERT2/β-catenin ex3 flox 、Sox10-CreERT2/β-catenin ex2-6 flox/floxマウスにおいても同様の実験を行っている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

上記マウス作製のために、時間を要したため。

Strategy for Future Research Activity

PI3K/AktシグナルについてはSox10-CreERT2/Pten flox/floxマウス、Sox10-CreERT2/Rosa26-stop-Ptenマウスを用いて坐骨神経損傷モデルを作製し、損傷後3日、5日、7日、14日、28日で坐骨神経損傷部のRNA、タンパク、組織標本を回収し、シュワン細胞の分化状態の変化、軸索伸長能を評価するとともに、下肢筋の神経再支配の程度をトレッドミル走行試験、下腿筋体積測定により評価する。
また、Wnt/β-cateninシグナルの関与を解析についても Sox10-CreERT2/β-catenin ex3 flox、Sox10-CreERT2/β-catenin ex2-6 flox/floxマウスを用いて上記と同様の評価を行う。