Effect of TSPAN12 on osteosarcoma cells

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09329
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 寺内 竜 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (20575154)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 土田 真嗣 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10719834) ; 白井 寿治 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (20397186)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: TSPAN12 / RNA sequence / MMP

Outline of Annual Research Achievements

本年は、siRNAの作成し、Real time Glo MT cell viabilityで増殖抑制効果を評価した。次にFACSで細胞周期とアポトーシスを解析した。その後、rtPCRでMMP2,9,14を評価した。また、RNA sequenceを行い、コントロールと比較しての発現変動を評価した。
結果として、cell viabilityはコントロールと比較して濃度・時間依存性に抑制した。FACSではアポトーシスおよび細胞周期に有意な関係性は認めなかTSPAN12以上の発現を認めた膜タンパクが存在した。TSPANのなかではTSPAN12は上位ではなかった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

当初はsiRNAを用いた実験が一通り終えてin vivoの実験に取り掛かる時期であるが、siRNAの実験結果が予想と反した結果であり、実験プロトコールの再考が必要とされている。

Strategy for Future Research Activity

今後、siRNAを用いた実験プロトコールを再検討し、TSPAN12と骨肉腫との関係性を追求する。また、同時並行としてin vivoでもTSPAN12との関係性を評価する。

Causes of Carryover

次年度でin vivoでの実験を予定していたため、そこに十分な費用をあてる必要があったため。またプロトコールの再検討を行う必要があり、その上で追加実験を行う可能性があったため。