遺伝子改変ネオアンチゲン特異的T細胞による泌尿器癌個別化免疫療法の開発

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09343
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 加藤 大悟 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (70648021)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 清谷 一馬 公益財団法人がん研究会, がんプレシジョン医療研究センター 免疫ゲノム医療開発プロジェクト, 主任研究員 (30433642)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 免疫療法 / ネオアンチゲン / 遺伝子改変T細胞

Outline of Annual Research Achievements

現在までに腎細胞癌に対して手術療法を施行した患者10名より、手術検体および末梢血Peripheral Blood Mononuclear Cells（PBMCs）を採取し、DNA/RNAを抽出した。これらを用いて全エクソーム解析、トランスクリプトーム解析を行い、各々の腫瘍組織において、変異RNAの発現しているネオアンチゲンを予測した。これら予測された複数のネオアンチゲンのうち、HLAと高親和性（Mut IC50<50nM）を1患者当たり3個程度選択し、ネオアンチゲンペプチドを作成した。また同時にQuick switchカスタムテトラマーキットを用いて、予測したネオアンチゲンペプチドに対するペプチド-HLAマルチマーを作成できたため。現在健常人PBMCや患者から採取したPBMCを用いて、これらのネオアンチゲン特異的T細胞の誘導を試みている。
また同患者の腫瘍組織より腫瘍浸潤リンパ球や癌細胞を単離した。単離した癌細胞を初代癌細胞として培養を行い、細胞株の樹立に成功した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究計画書で計画したマイルストーンにしたがって、研究を行うことができている。今後も研究期間内に研究を完遂できる様に、計画通りに進めていく予定である。

Strategy for Future Research Activity

今後いくつかのネオアンチゲン特異的T細胞が誘導できれば、RNA抽出後にネオアンチゲン特異的T細胞受容体のComplementarity determining region 3（CDR3, 相補的決定領域）を同定し、遺伝子改変ネオアンチゲン特異的T細胞を作成する。レンチウィルスによるT細胞上のネオアンチゲン特異的T細胞受容体発現効率を確認した後に、遺伝子改変ネオアンチゲン特異的T細胞と先述の初代癌細胞株を標的細胞とした、細胞傷害性評価を行う予定である。

Causes of Carryover

研究を進めていくうえで必要に応じて研究費を執行したため、当初の見込み額と執行金額が異なった。