ヒト胚発育動態と細胞内外の電解質の時間的・空間的変化との関連

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09439
• Research Institution: Akita University
• Principal Investigator: 熊澤 由紀代 秋田大学, 医学部附属病院, 准教授 (70400504)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤嶋 明子 秋田大学, 医学部附属病院, 助教 (00866460) ; 寺田 幸弘 秋田大学, 医学系研究科, 教授 (10260431) ; 高橋 和政 秋田大学, 医学部附属病院, 技術系スタッフ (60791910)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 胚盤胞 / Naインジケーター / Kインジケーター / Na/K ATPase / サブユニット

Outline of Annual Research Achievements

当施設ではこれまでに1波長性のNa/Kインジケーターを用いて、Na/Kの胚盤胞における動態を明らかにした。ただし1波長性のインジケーターでは、インジケーター濃度分布が観察結果に影響を及ぼす可能性があり、2波長性のインジケーターを用い、インジケーターの分布の均一性に影響されないより精密なNa/Kの動態の観測を試みた。結果として２波長性インジケーターの使用でより客観性をもった電解質動態解析が可能となり当該年度の日本産科婦人科学会および日本生殖医学会で報告した。論文は作成中である。
Na/K移動で重要な役割をするNa/K ATPaseについて、その分子については殆ど知見がない、そこで構成するサブユニットα・βにつきそのアイソフォームについてq-RT-PCRを用いて解析し、α1およびβ3が有意に多く発現し、また免疫染色によりそれらが胞胚腔内壁に集中して発現いることを確認し論文発表を行い国際誌であるHuman Reproductionに当該年度に掲載された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本研究の目的であるNa/K ATPaseの胚盤胞におけるmRNAの発現解析に関しては、順調に進み、最終的にそのアイソフォームの違いを解明するまでに至った。
一方、イオンインジケーターをもちいたナトリウム・カリウムの動態解析に関しては、２波長性のインジケーターを用いることでその挙動解析にさらに客観性を持たせる可能性を示した。

Strategy for Future Research Activity

同様の手法を用いて、ヒト胚盤胞におけるNa/Kの動態を検証する。
結果を解析し、まとめ学会・論文等で発信を目指す。

Causes of Carryover

未だ明瞭な知見が得られていない、イオンインジケーターによる胚盤胞におけるナトリウム・カリウム動態の追加検証と、それについて得られた知見に関する論文発表に係る費用を要する。