子宮内膜症と卵巣癌における脂質代謝によるフェロトーシスの役割

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09514
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 山口 建 京都大学, 医学研究科, 講師 (20378772)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 馬場 長 岩手医科大学, 医学部, 教授 (60508240) ; 山ノ井 康二 京都大学, 医学研究科, 助教 (70868075) ; 万代 昌紀 京都大学, 医学研究科, 教授 (80283597)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 卵巣癌 / 明細胞癌 / フェロトーシス / Hippoシグナル

Outline of Annual Research Achievements

卵巣細胞株パネルを用いてフェロトーシス誘導剤（エラスチン、ML210）の50%阻害濃度（IC50値）を測定した。卵巣明細胞癌株は他の組織型の株と比較してIC50値が高く、明細胞癌はフェロトーシス耐性であることが示唆された。また、シスプラチンIC50値が高い細胞株では有意にエラスチンIC50値が高かった。フェロトーシス誘導剤（エラスチン）のIC50が高い細胞株は低い細胞株と比較して細胞接着に関わる遺伝子が多く含まれていた。Hippoシグナルは細胞接着に関わるパスウェイである。
臨床組織でも検討するために、フェロトーシス関連マーカーであるMDAと酸化ストレスDNA損傷マーカーである8ーOHdGの免疫組織染色を行った。明細胞癌は高異型度漿液性癌よりも有意に8ーOHdGやMDAが強く染まっていた。つまり、明細胞癌は最も酸化ストレスやフェロトーシスになる環境の中で発育していることが示唆された。また、Hippoシグナルの最終的な調整因子である転写因子YAPを免疫組織染色で評価すると、明細胞癌は高異型度漿液性癌よりも核のYAP染色が弱かった。また、明細胞癌症例において核YAPが低発現な症例は高発現の症例と比較して有意に全生存期間が短かった。
明細胞癌におけるYAPの役割を明らかにするために活性型YAPを遺伝子導入し、フェロトーシスへの影響を検討した。活性型YAP導入株ではコントロールよりもフェロトーシス誘導剤により細胞死が増えフェロトーシスマーカーが上昇した。また、YAP活性を制御することが知られているLATS1/2を抑制した明細胞癌株においては細胞死やフェロトーシスマーカーは上昇する株と抑制する株とあった。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

仮説通りに明細胞癌は他の組織型よりもフェロトーシス誘導剤に対して抵抗性を示す結果であった。明細胞癌においてHippoシグナルが最終的に調整するYAPは高異型度漿液性癌よりも核での発現が低くなり、フェロトーシスになりにくいことが示唆された。
卵巣明細胞癌細胞株を用いてHippoシグナルによりフェロトーシスが変わることを機能実験で確認した。

Strategy for Future Research Activity

YAP活性を制御する分子を探索する。
マウス卵巣明細胞癌モデルを用いてYAP活性や、YAP活性を制御する分子を制御することでフェロトーシスに陥りやすくなるか、治療標的の可能性について検討する。

Causes of Carryover

明細胞癌細胞株を用いてYAP活性、YAPを制御する因子の機能実験を行うため、細胞培養、実験試薬、マウス実験費に用いる