Epigenetic Approaches for the Elucidation of Preeclampsia Development Mechanisms in Primary Placenta

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09551
• Research Institution: Showa University
• Principal Investigator: 川嶋 章弘 昭和大学, 医学部, 講師 (10783376)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 関沢 明彦 昭和大学, 医学部, 教授 (10245839)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 妊娠高血圧腎症 / エピゲノム / メチル化異常

Outline of Annual Research Achievements

2021年度、①妊娠経過における胎盤のエピゲノム機構による遺伝子発現調整の解明を行うために妊娠初期の胎盤組織の収集を行なった。②妊娠高血圧腎症を発症する胎盤の初期のDNA メチル化異常の抽出のために、これまでの研究業績（バイサルファイトシーケンス解析で妊娠高血圧腎症を発症する妊娠初期の胎盤組織におけるメチル化異常部位の候補遺伝子抽出）において得られたメチル化異常が妊娠高血圧腎症を発症する妊婦において特異的なエピゲノム異常を呈することを確認した。これを確認するために妊娠初期の胎盤組織由来の血漿cell-free DNAからさきの候補遺伝子のメチル化異常を検討した。血漿cell-free DNA中から胎盤組織のメチル化異常を検出するために妊娠初期の胎盤DNAで末梢血単核球DNAと比較して高メチル化のプロモーター領域をもつ遺伝子を抽出した。抽出された妊娠初期の胎盤で高メチル化遺伝子のうち妊娠高血圧腎症を発症する妊娠初期の胎盤でより高メチル化異常をきたす遺伝子を候補遺伝子とした。血漿cell-free DNAが微量であることから高感度かつ高精度なdigital droplet PCRを用いた。妊娠初期の胎盤DNAにて候補遺伝子のメチル化をメチル化配列特異的PCR解析で確認した。正常胎盤でメチル化異常を認めなかったプライマー・プローブで妊娠12、13週の妊婦の血漿cell-free DNAを対象に検討したところADORA2B,HOXB4のプロモーター領域のメチル化異常を確認した。現在、妊娠初期胎盤で同遺伝子のヒストン修飾部位の検討をおこなっている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

妊娠高血圧腎症発症の原因となりうる妊娠初期のメチル化異常を多数の症例を対象に検討を行い候補遺伝子の抽出を行なった。これらの遺伝子を対象に妊娠初期の胎盤組織および血漿から遺伝子発現解析をおこなっている。

Strategy for Future Research Activity

妊娠高血圧腎症を発症する妊娠初期の胎盤DNAメチル化異常を認めた遺伝子を、妊娠初期胎盤にてChP-PCRで検討を行う。妊娠経過におけるオープンクロマチン領域の解析を収集した妊娠初期の胎盤、満期胎盤にて検討を行う。