2021 Fiscal Year Research-status Report
Endothelial colony forming cells in retinal vasculature
| Project/Area Number |
21K09674
|
|---|
| Research Institution | Osaka University |
|---|
Principal Investigator |
崎元 晋 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (60633047)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| Keywords | 網膜血管 / 血管内皮コロニー形成細胞 / 血管内皮細胞 / 糖尿病網膜症 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
血管内皮コロニー形成細胞（Endothelial colony-forming cells: ECFCs）は、細胞治療に用いるヒトないしは自家血管内皮細胞のソースとして知られているが、近年広義のECFCとして、生体内における血管内皮幹/前駆細胞の存在が注目されている。申請者は、最近報告されているCD157、CD201などのマーカーに着目し、網膜血管におけるECFCの同定とニッチ環境の解明を計画している。マウス網膜血管内皮細胞を用いたシングルセルRNAseq解析結果を用い、特定のクラスターに発現する遺伝子の機能解析を行った。遺伝子Aおよび遺伝子Bのノックダウンを、培養血管内皮細胞（ヒト臍帯静脈血管内皮細胞（HUVEC）、マウス脳血管内皮細胞（bEND3）、ヒト網膜血管内皮細胞（HRMEC））に行い、増殖活性、遊走活性、血管新生能を検討した。増殖活性はMTTアッセイ、遊走活性はスクラッチアッセイ、血管新生能はtube-formation assayを行った。遺伝子Aのノックダウンでは、上記アッセイにて明らかな変化を認めなかったが、遺伝子Bをノックダウンした細胞では、MTTアッセイにて細胞増殖は亢進しており、tube-formationアッセイでもネットワーク形成能が亢進していた。また遺伝子Bをレンチウイルスを用いてHUVECにて過剰発現させると、増殖活性の低下が認められた。今後遺伝子A、Bのin vivoにおける機能解析を行っていく予定である。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
上記の通り、特定遺伝子の機能解析を行い興味深い結果が得られている。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後遺伝子A、Bのin vivoにおける機能解析を行っていく予定である。
|
Research Products
(5 results)
