酸化リン脂質によるぶどう膜炎での網膜細胞障害メカニズムの解明

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09680
• Research Institution: Health Sciences University of Hokkaido
• Principal Investigator: 平岡 美紀 北海道医療大学, 予防医療科学センター, 准教授 (80246983)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 北市 伸義 北海道医療大学, 予防医療科学センター, 教授 (40431366) ; 南場 研一 北海道大学, 大学病院, 講師 (70333599)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 酸化リン脂質 / ぶどう膜炎 / 網膜障害

Outline of Annual Research Achievements

ぶどう膜炎で炎症が重篤あるいは遷延した例では、炎症がおさまった後でも網膜の不可逆的な障害により、視機能が回復しない。また、ぶどう膜炎では酸化ストレスが生じることが知られている。この酸化ストレスによって生じる酸化リン脂質とぶどう膜炎での網膜障害の関係について、明らかにするのが本研究の目的である。
2021年度の研究計画と実施状況について、以下に記す。
1. 臨床例での網膜障害における酸化リン脂質分布の違いを調べるために、まず、臨床検体を用いて、網膜障害のあるぶどう膜炎群と明らかな網膜障害のないぶどう膜炎群、眼内炎症のない群について、それぞれ採取した硝子体の酸化リン脂質プロファイルを質量分析(LC-MS)にて、分析を行なった。現在、統計解析中である。
2. ぶどう膜炎の動物モデルでの網膜組織の酸化リン脂質分布を調べるために、実験的自己免疫性ぶどう膜炎モデルラットを用いて、炎症前、炎症極期の網膜を摘出し、網膜の酸化リン脂質プロファイルを質量分析(LC-MS)にて、分析を行なった。その結果、ラットの網膜では１１種の短鎖型の酸化リン脂質が検出され、そのうちのいくつかは、炎症のないものと比べ炎症極期の網膜では、量が高い傾向にあった。現在、統計解析中である。
これまでの結果から、ぶどう膜炎に引き続いて起こる酸化リン脂質の変化と網膜障害の関係を見出すことができる。これにより酸化リン脂質が網膜障害のマーカーとなり得ると考えられる。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

これまで、ぶどう膜炎症例について、その臨床検体である硝子体を収集し、リン脂質のプロファイルの解析を行なった。
一方、動物モデルでは、網膜に炎症のある動物と炎症のない動物のそれぞれの網膜について、リン脂質のプロファイルの解析を行なった。

Strategy for Future Research Activity

今後は以下の内容を予定している。
1. ぶどう膜炎の臨床例において、硝子体中の酸化リン脂質と酸化ストレスの関係を明らかにするために、酸化ストレスマーカー(HEL)と酸化リン脂質の組成との関係を調べる。
2. ラットの網膜を摘出し、酸化リン脂質を添加した際の網膜障害を生化学的、組織学的に検討する。
3. 網膜細胞株に酸化リン脂質を添加して、細胞障害を誘導する系で、酸化リン脂質分解酵素を加えた時の網膜障害の抑制効果を調べる。

Causes of Carryover

酸化リン脂質のプロファイル分析は、外部に委託して行なった。解析の料金は１サンプルあたり約80,000円である。統計学的に有効なサンプル数にするために、10サンプル分の解析を委託した。そのため、「その他」に委託解析代を計上した。この解析は、次年度に行う予定であったが、当初の計画より早くサンプルが入手できたので、前倒し請求を行い、プロファイル分析を委託した。