2021 Fiscal Year Research-status Report
筋原性前駆細胞に対する伸展誘導信号の抑制による「戻り」のない新規斜視治療法の開発
| Project/Area Number |
21K09755
|
|---|
| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
|---|
Principal Investigator |
飯田 貴絵 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助教 (00897168)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山澤 徳志子 東京慈恵会医科大学, 医学部, 准教授 (00282616)
秋山 暢丈 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (00338865)
中原 直哉 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助教 (10632193)
山口 眞紀 東京慈恵会医科大学, 医学部, 准教授 (30271315)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| Keywords | 筋原性前駆細胞 / 斜視 / 術後の戻り / DNAマイクロアレイ / 筋節長 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
斜視手術（縫縮術）を施行したウサギの外眼筋を術直後と術後1週間でinvivoで固定した後、筋長の測定及びレーザー光回折法にて筋節長を測定したところ、縫縮術を施行した外眼筋では術直後に筋節長は増大した後、1週間後には元に戻る傾向を示した。ウサギの眼位は術後1週間で直後に比較し戻りを認めており、筋長も術後1週間で増加していた。ウエスタンブロットによるタンパク発現解析では、術後1週間で術直後に比べてEmbryonic myosin heavy chainの増加を認めた。これらの結果より、縫縮術による筋伸展に伴い、外眼筋の筋原性前駆細胞が活性化され、筋の長さ方向への筋新生が起こり、筋節長の最適化が起こった可能性が示唆された。我々は、斜視手術後の戻りには、手術による筋原性前駆細胞の活性化が関与しているという仮説をたて実験を開始したが、仮説に矛盾しない結果であった。
現在我々は、斜視手術後の筋原性前駆細胞の活性化経路の特定のため、DNAマイクロアレイによる遺伝子発現解析を施行している。非手術眼を対照とし、術眼の縫縮部と伸展部、術眼拮抗筋における遺伝子発現量の変化を調べたところ、発現量の変化が外眼筋の術後の静止張力と相関のある複数個の候補遺伝子を検出した。今後は、解析を重ねることにより、候補遺伝子の更なる絞り込みと再現性を確認したい。筋原性前駆細胞の活性化に関わる候補遺伝子を検出できれば、今後活性化の抑制剤の探索や、動物から単離した筋原性前駆細胞におけるinvitroでの効果の検証など、斜視手術後の戻りの抑制に関する治療法の研究に大きな期待が持てると考えられる。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の予定であった、斜視手術後の筋長や筋節長などのモニタリングはおおむね予定通り進んでいる。一部再現性の確認のための目標家兎数まで達していない項目もあるので、今後追加予定である。
筋原性前駆細胞の活性化経路の探索におけるDNAマイクロアレイ解析では、一度解析を行い、複数個の候補遺伝子を検出することができた。今後は解析を重ね、再現性や候補遺伝子の特定が必要となる。外眼筋からのRNA抽出における検体の精製では不備があることもしばしばで、解析までたどり着かないケースも多々認めるが、活性化経路の探索は今後の治療法の開発においても重要な段階であり、焦らず慎重・確実に行っていきたい。
|
| Strategy for Future Research Activity |
次年度は斜視手術後の筋長や筋節長のモニタリングの完結と、DNAマイクロアレイによる筋原性前駆細胞の活性化経路に関する発現遺伝子の特定を施行予定である。筋原性前駆細胞の活性化経路における鍵物質を特定した後は、抑制剤の探索と動物におけるinvitroでの抑制効果の検証を施行する予定である。
|
| Causes of Carryover |
マイクロアレイのRNAの精製で不備があり、解析まですすまなかった検体があり解析料を使用しなかったため。
|
