2023 Fiscal Year Research-status Report
外陰圧リンパ浮腫モデルでの脂肪増生の検討 -スキャフォールド移植の新たな可能性-
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21K09788
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
森 弘樹 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (80345305)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
植村 法子 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 講師 (10568017)
田中 顕太郎 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (20569503)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | スキャフォールド / 脂肪再生 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年、乳房再建において、スキャフォールドを移植する考えが提唱され、脂肪を注入するためのスペースを確保する観点から体外式組織拡張器が注目されている。そして、リンパ浮腫で脂肪増生が起こることはよく知られている。これらの背景のもと、「スキャフォールドの移植とそれを維持する外陰圧装置とリンパ液 の漏出によりリンパ浮腫の病態を作成すれば脂肪増生を促せる」と仮説をたてた。本研究は培養実験により各種スキャフォールドと脂肪細胞の3次元培養における脂肪細胞の接着・増生の比較を行う。また動物実験によってスキャフォールドと外陰圧装置による耐圧空間の作成とリンパ漏出モデルを作成し、このモデルを 用いて脂肪増生の比較を行う。これらによって乳房再建の新たな治療法の開発を試みる。
今年度は【研究1:各種スキャフォールドでの脂肪前駆細胞培養】としてコラーゲンの2形態、ハイドロスキャフォールド 1枚および3枚の4種類について、ヒト脂肪前駆細胞を播種し、培養2週後に脂肪細胞蛍光染色(BODIPY)、接着因子(ingtegrin, fibronectin)の発現を評価し、その結果を学会にて公表した。【研究2:リンパ漏モデルの作成】についてはラットでの胸管露出、シリコンマイクロチューブの留置については施行できたが、実験モデルとして安定せずリンパ漏モデルの作成は断念した。【研究3：耐圧モデルによる比較実験】については計画の見直しを行い、1. スキャフォールド植え込みのみ、2. スキャフォールド＋疑似陰圧ドーム、3. スキャフォールド＋疑似陰圧ドーム＋脂肪移植の群で比較を行うこととして準備を進めた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
研究1の各種スキャフォールドでの脂肪前駆細胞培養では概ね予定通りに完了し、動物実験で用いるスキャフォールドの選定が整ったが。研究2の動物実験についてはラットに切り替えたものの、実験が安定せず、リンパ液の誘導実験は断念せざるをえなかった。このため研究3への取り掛かりが遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究を1年延長し、【研究3:耐圧モデルによる比較実験】に進む。ヌードマウスを用いて、1. スキャフォールド植え込みのみ 2. スキャフォールド+疑似陰圧ドーム 3. スキャフォールド+疑似陰圧ドーム+脂肪移植を行う。評価はマイクロCTと組織学的評価を行う。3, 6, 9, 12週で安楽死後、背部の組織を採取し、脂肪細胞はperilipin 、脂肪増生はPPARγ, およびadiponection、血管内皮細胞はCD31の蛍光免疫染色によって評価する。脂肪移植の厳密な評価を行うために【緑色蛍光タンパク質 EGFP 遺伝子導入された脂肪移植＋疑似陰圧ドーム実験も追加で検討している。
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| Causes of Carryover |
動物実験が遅れ、リンパ漏モデルを断念したことが大きい。スキャフォールドを動物に移植する実験の計画の修正を要し、進行が止まっている。次年度はヌードマウスへのスキャフォールド植え込み実験が本格化するため、細胞や抗体も含めて支出が増え、実験の仕上げを行う見込みである。
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