2021 Fiscal Year Research-status Report
脂肪由来間葉系幹細胞の分化ポテンシャル予知マーカーシステムの開発
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21K09792
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
金輪 真佐美 (福永真佐美) 広島大学, 自然科学研究支援開発センター, 助教 (00284208)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤本 勝巳 広島大学, 医系科学研究科(歯), 助教 (40294566)
平田 伊佐雄 広島大学, 医系科学研究科(歯), 助教 (40346507)
中島 歩 広島大学, 医系科学研究科(医), 共同研究講座教授 (40448262)
河本 健 広島大学, 学術・社会連携室, 特任教授 (50224861)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 間葉系幹細胞 / 脂肪 / ＤＮＡマイクロアレイ / 遺伝子発現 / 線維芽細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
再生医療に用いられる間葉系幹細胞（MSC）の分化能の程度や分化の方向性は一定ではない。MSCの同定には数種類の表面抗原の分析が行われているが、定量性が低いためMSCの分化能の程度や方向性を正確に見極めにくい。そこで申請者はここ数年MSCの分化能の程度や方向性を分化以前に予測できる遺伝子マーカーを検討してきた。即ち、骨髄由来MSCの骨、軟骨脂肪への3方向の分化能を測定し、測定した値と分化前の遺伝子発現レベルの相関性について分析した結果、数種類の分化予知遺伝子マーカーを同定することに成功した。本研究では脂肪組織から分離されるMSCを対象として分化予知遺伝子マーカーを同定することを目的に研究を行った。分化予知マーカーを探索するにあたり、脂肪由来MSCの遺伝子マーカーについて先に検討することとした。現在いろいろな細胞の遺伝子発現のデータは広くインターネットに公開されている。幹細胞の遺伝子発現パターンは培養法などの違いによって異なる。再生医療に遺伝子マーカーを応用するためにはなるべく培養法が違っていても広く共通する遺伝子マーカーが必要であると考えられることからまずインターネットに公開されているＤＮＡマイクロアレイのデータを遺伝子マーカー選択のために解析することとした。分化能がほとんどない線維芽細胞と、今まで検討してきた骨髄由来MSC、脂肪由来MSCを対象とした。骨髄由来MSC（BMMSC）3株、脂肪由来MSC（ASC）3株、を線維芽細（FB）胞3株（GSE9451、GSE66084を利用)と比較した結果、BMMSC＞2FBの遺伝子（プローブID）数625個、ASC＞2FBは1091個であった。BMMSCとASCに共通してFBよりも2倍高い発現レベルであった遺伝子は（プローブID）255個であった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
脂肪由来MSCの遺伝子発現について骨髄由来MSCとの違いを線維芽細胞と比較してそれらの違いを確認することができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
幹細胞に発現している遺伝子は培養条件などに左右される。培養条件に左右されない遺伝子を分化予知マーカーとして同定することが理想的である。したがってインターネットに公開されているDNAマイクロアレイのデータ（脂肪由来MSC、骨髄由来MSC、線維芽細胞）を今回の研究と同様な手法を用いてさらに分析し、今回のデータと比較検討し、線維芽細胞より高い遺伝子発現を示す遺伝子を脂肪由来MSCと骨髄由来MSCで比較し共通する遺伝子を探索する。一方脂肪由来MSCを培養し分化誘導実験を行う。
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| Causes of Carryover |
申請当初の計画では脂肪由来MSCの分化予知遺伝子マーカーを同定するために細胞の培養、RNA抽出、DNAマイクロアレイの実験を行う予定であったが、培養法の違いによらない遺伝子マーカーを同定することが重要であると考えられたのでインターネット上に公開されているデータをまずは分析することにした。従って細胞の培養などにかかる消耗品代が余剰となった。さらに多数のインターネットに公開されている遺伝子データを分析する必要があるため
受託費用に充てる予定である。
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Research Products
(2 results)
