2022 Fiscal Year Research-status Report
歯周病発症における新規小胞輸送因子の分子機構の解析
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21K09844
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
近藤 好夫 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 助教 (30581954)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
筑波 隆幸 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 教授 (30264055)
門脇 知子 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 教授 (70336080)
鵜飼 孝 長崎大学, 病院(歯学系), 教授 (20295091)
佐藤 啓子 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 准教授 (70410579)
藤原 卓 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 教授 (00228975) [Withdrawn]
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 歯周病 / 小胞輸送 / 感染実験モデル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯周病は細菌感染により免疫細胞と破骨細胞が活性化されて惹起する炎症性疾患である。わたしたちの以前の研究から破骨細胞の分化過程で増大する新規遺伝子Rab44を発見し、さらにRab44が免疫系細胞にも発現していることを見出した。一般的に低分子Rabタンパク質は細胞内の小胞輸送を制御している。Rab44はアミノ末端にいくつかのドメイン構造を有する高分子Rabタンパク質で、生体内でのその機能は不明である。本研究ではRab44欠損マウスを用いて歯周病モデルを作製し、Rab44の分子機構とその病態への関与を解明する。これまでにマウスに歯周病を発症させるために、接種する菌株、量、接種方法あるいは接種回数などのさまざまな条件を振り分けて感染実験を遂行した。非感染群と感染群を組織学的あるいは生化学的評価をおこない、炎症の程度を評価した。組織学的な評価のためマウスを屠殺後に上顎を摘出し、パラホルムアルデヒド固定を行なったのちに、脱灰処理を行い段階的に脱水後、パラフィン包埋をおこなった。包埋後は薄切して顕微鏡下にて組織学的な評価をおこなった。生化学的な評価としては、歯周組織を切除し、炎症性サイトカインの発現量をリアルタイムPCRを行い定量比較した。これらとともにマイクロCTによる解析をおこない上顎歯槽骨破壊を評価した。これまでに、歯周病関連細菌の一種であるPorphyromonas gingivalisをマウス口腔内に接種することによって初期的な歯周炎を発症することに成功し、野生型マウスとRab44ノックアウトマウスを用いて感染実験をおこなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
歯周炎を発症する条件決定ができ、野生型マウスとノックアウトマウスで実験をおこなった。組織学的にもこれらの２群間でも違いを認めており、現在は定量化するためのデータ収集と解析をおこなっており、おおむね順調に進展していると考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
感染実験よりえられた結果を定量化するためのデータ収集と解析をおこなう。
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| Causes of Carryover |
感染実験において当初予定してたよりも感染期間を長めに設定する必要があり、解析で必要な消耗品の一部の購入を繰り越したため。定量解析に必要な消耗品を購入に充てる予定。
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