2022 Fiscal Year Research-status Report
New diagnostic method of oral dryness by ELISA method produced by using salivary biomarker as an antigen
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21K10012
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
水橋 史 (高橋史) 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 教授 (60386266)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹澤 晴香 (山口晴香) 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 講師 (00756942)
戸谷 収二 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 教授 (20287791)
森田 貴雄 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 教授 (20326549)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 唾液バイオマーカー / 口腔乾燥症 / Ca拮抗薬 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
現在の超高齢社会において，口腔乾燥症の患者が増加しており，多くの高齢者が薬物を服用していることから薬物性の口腔乾燥症，特にCa 拮抗薬によるものが非常に多い。しかし，未だに口腔乾燥症の確定診断には至っていない。本研究では，唾液中タンパク質とRNAから，Ca 拮抗薬による口腔乾燥症に特有の唾液バイオマーカーを決定し，唾液バイオマーカーを抗原としたELISAキットを新規に作製して，口腔乾燥症の確定診断を行うことを目的としている。
令和４年度は，令和３年度に感染予防対策のために行うことができなかった，Ca 拮抗薬服用者と内服薬のない健常高齢者の唾液採取を行うことができた（水橋，戸谷）。新たに採取したCa 拮抗薬服用者と内服薬のない健常高齢者の唾液を用いて，Western blottingを行った（水橋，森田，竹澤）。Western blottingにより標的遺伝子にコードされるタンパク質の検出確認を行うとともに，リアルタイムPCR によるRNAレベルの測定を行い，標的遺伝子の検出確認を行っているところである。
さらに，Ca 拮抗薬による口腔乾燥症に特有の唾液バイオマーカーを決定することができた。ターゲットタンパク質を抗原としたELISAキットの作製について，委託により開始した。現在，市販抗体と市販抗原を用いて，ELISA初期検討を行っているところである。
令和４年度までの研究成果をまとめ，口腔乾燥症の唾液バイオマーカーの模索に関する論文を投稿中（水橋）である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
令和３年度の研究計画であった，Ca 拮抗薬服用者と内服薬のない健常高齢者の唾液採取を令和４年度に行い，さらに，採取した唾液を用いてWestern blottingとRT-PCR ，リアルタイムPCR を行った。令和４年度に行うことを計画していた唾液バイオマーカーを抗原としたELISAキットの作製は，現在進行しているが，まだ完成しておらず，やや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和５年度には，臨床応用に向けて，Ca 拮抗薬服用者と内服薬のない健常高齢者の唾液採取を継続する（水橋，戸谷）。
唾液バイオマーカーを抗原としたELISAキットの作製を委託により開始しているが，これを令和５年度内に完了させる方策である（水橋，森田，竹澤）。完了し次第，臨床応用にとりかかる（水橋，戸谷）。
令和５年度の研究成果発表を行うとともに，論文作成を行う（水橋）。
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| Causes of Carryover |
令和４年度は，令和３年度に感染予防対策のために行うことができなかった唾液採取を行い，その後のWestern blottingとRT-PCRおよびリアルタイムPCRを施行した。その後に，唾液バイオマーカーを抗原としたELISAキット作製の委託を開始し，初期検討に必要な抗原および抗体の購入を行った。また，サンドイッチ法ELISA測定系構築を委託したが，いずれも年度末であったため，次年度使用額となる。
次年度使用額と当該年度以降分として請求する助成金は，令和５年度に行う唾液バイオマーカーを抗原としたELISAキットの作製費用として使用する計画である。
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