2021 Fiscal Year Research-status Report
長鎖非コードRNAによる骨細胞メカニカルストレス応答制御機構の解明
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21K10189
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
石川 崇典 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 助教 (70845809)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宮脇 正一 鹿児島大学, 医歯学域歯学系, 教授 (80295807)
前田 綾 鹿児島大学, 医歯学域歯学系, 講師 (10457666)
大賀 泰彦 鹿児島大学, 医歯学域歯学系, 助教 (40780002)
久保田 聡 岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (90221936)
西田 崇 岡山大学, 医歯薬学域, 准教授 (30322233)
服部 高子 岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (00228488)
高江洲 かずみ (河田かずみ) 岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (10457228)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | lncRNA / 骨細胞 / メカニカルストレス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
最近、タンパク質をコードしない長鎖非コードRNAが様々な生理的機能に関与していることが明らかとなっている。しかしながら、矯正歯科治療における歯の移動において極めて重要な生体反応である、骨細胞のメカニカルストレス応答に関与するとされる長鎖非コードRNAの報告はまだない。そこで、本研究では骨細胞のメカニカルストレス応答下で機能する長鎖非コードRNAを特定し、その詳細な分子機構を明らかにすることを目的とし、研究を実施している。
目的とする長鎖非コードRNAを特定するため、マイクロアレイによる網羅的遺伝子発現解析を予定しており、初年度はまず実施するサンプルの条件を検討した。骨細胞様細胞株MLO-Y4細胞を培養し、同細胞に様々な種類のメカニカルストレスを負荷後、同サンプルを回収し、骨芽細胞マーカー遺伝子および骨芽細胞分化に関与しているとされる長鎖非コードRNAを定量RT-PCRにより評価し、マイクロアレイを実施するサンプルの選定を行った。初年度末の時点で概ね本作業は完了しており、今後はコントロール群と比較し遺伝子変動の大きかった方法でメカニカルストレスを付与したMLO-Y4細胞を準備し、網羅的遺伝子発現解析を実施していく。同サンプルの解析結果より、特定の長鎖非コードRNAの遺伝子発現の上昇もしくは低下が確認できると考えており、2年目以降では、その中で特に遺伝子発現の変動が多かったRNAをin vitroにてノックダウンおよび強制発現させ、骨代謝マーカー遺伝子の発現変動を確認し詳細な機能を調査することとしている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
網羅的遺伝子発現解析を実施する前の実験条件の検討に時間を要した。今後、網羅的遺伝子解析を実施し、ターゲットとしている長鎖非コードRNAの特定を急ぐこととする。
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| Strategy for Future Research Activity |
初年度に実施した実験条件の検討内容をもとに、網羅的遺伝子解析の使用するサンプルの準備を進め、まずはターゲットとする長鎖非コードRNAの特定を進めていく。その後は、遺伝子変動の大きかったRNAの選択し、in vitroでの検証を進めていく。
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| Causes of Carryover |
前年度に購入した物品および、研究室で使用していた物品で初年度の研究はまかなうことができた。また、2年目以降は外注による遺伝子発現解析も控えており、支出は増加すると思われる。
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