2022 Fiscal Year Research-status Report
口腔常在菌のreplaceによる歯周病予防ツールの開発
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21K10239
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
田中 とも子 日本歯科大学, 生命歯学部, 准教授 (70307958)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
八重垣 健 日本歯科大学, 生命歯学部, 教授 (40166468) [Withdrawn]
堀江 哲郎 日本歯科大学, 生命歯学部, 講師 (10508675)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | バイオフィルム / Red Complex / 歯周病 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は口腔常在菌のreplaceによるバイオフィルム形成抑制効果について検討し、口腔バイオフィルムの健全化による歯周病予防ツール開発を最終目的とする。本年度は歯周病原細菌４菌種を用いて、歯根上へのバイオフィルム形成を試みた。さらに、人工バイオフィルムの経時的変化を確認した。
使用菌株はPorphyromonas gingivalis (P. g) ATCC33277、Tannerella forsythia (T. f) ATCC43037、Treponema denticola (T. d) ATCC35405、Fusobacterium nucleatum（F. n）ATCC 25586、Streptococcus gordonii (S. g) ATCC10558である。バイオフィルム形成には、0.1％ N-acetylmuramic acid添加TYGVS 培地を用い、昨年度と同様の方法でヒト歯・歯根の切片上に行った。
はじめにODを1.0に調整したS.g懸濁液を、被験切片が設置された容器内に満たし、24時間培養した。次いで懸濁液を除去し、各ODを1.0に調整したP. g、T. f、T. dとF. nの懸濁液を被験切片が設置された容器内に入れ、さらに嫌気条件下（90％N2、５％CO2）で24時間培養した。バイオフィルムの観察はSEMにて行った。また、菌叢解析はOD 0.5、1.5の各細菌懸濁液を用いた人工バイオフィルムについても試みた。
SEM観察の結果、５菌種すべてがセメント質上に付着し、バイオフィルム形成が確認された。菌叢解析から人工バイオフィルムの成熟度および細菌密度の違いによって、動態が異なることが明らかになった。人工バイオフィルムを用いたシミュレーションを行うにあたっては細菌密度の条件などさらなる検討が必要であると考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
本年度もコロナ禍により必要な実験材料が大幅に遅延して納品されたことや研究時間の短縮、研究場所の縮小などが余儀なくされ作業効率が悪くなったこと、当初の研究分担者が急逝し、研究分担者が変更になったことなどから研究が予定より遅れてしまった。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、次のステップに用いる歯周病予防に効果があるとされるStreptococcus cristatus、Veillonella atypicaの培養法を確立し、2022年度研究計画に従い、候補菌のスクリーニングとして歯周病予防効果が期待される口腔常在菌をバイオフィルムに作用させる。さらにその効果のバイオフィルムに対する影響について評価する。
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| Causes of Carryover |
2022年度の研究に遅れが生じたため使用期限を最大限長くし、実験回数を多くする目的で、購入時期を次年度にずらしたため、生じた次年度使用額である。
2023年度の予定した実験と並行して、2022年度にやり残した歯周病予防効果が期待される口腔常在菌をバイオフィルムに作用させ、その候補菌のスクリーニングを行う。その効果のバイオフィルムに対する影響について評価しつつ、効率のよい研究計画を再考した。使用計画に問題はないと考えている。
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Research Products
(2 results)
