2022 Fiscal Year Research-status Report
メタ16S解析を用いた帝王切開出生児の口腔内細菌叢獲得機序の解明
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21K10266
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
佐野 拓人 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 助教 (90880592)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 拓一 新潟大学, 医歯学系, 教授 (10303132)
岡田 康男 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 教授 (40267266)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 口腔内細菌叢 / 16S rRNA / 新生児 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は分娩形式に関連した新生児口腔dysbiosisの発生プロセス及び、新生児の正常な口腔内細菌叢形成とは何かを明らかにするために、経時的に新生児口腔内細菌を質的（細菌叢構成）かつ量的（細菌量変動）に解析するものである。出生後3日から7日の新生児から滅菌スワブを用いて唾液を採取し試料とした。試料を緩衝液に懸濁し、ボルテックスで分散・均一化後、連続10倍希釈し、CDC血液寒天培地に接種し、好気および嫌気環境下で細菌培養を行った。培養により得られた細菌のコロニー数から新生児唾液中の細菌量（CFU/mL）を算出した。加えて、ヒト母乳には特有の細菌叢が存在していることが近年の研究で明らかになっており、新生児口腔内細菌叢形成過程にも影響を与えていることが推測される。このことから本研究では、新生児の口腔内擦過サンプルに加えて、滅菌搾乳器で搾乳した母乳も試料とし、母乳中の細菌の量的および質的解析も行っている。
結果として、新生児の口腔内擦過サンプルから得られた細菌量は、帝王切開児で平均(2.9 ± 2.7)×10の7乗 CFU/mL、自然分娩児では、平均(1.5 ± 3.2)×10の6乗 CFU/mLであった。母乳中の細菌量は、平均(1.4 ± 1.6) × 10の5乗 CFU/mLであった。現在、細菌叢構成を明らかにするため、細菌16S rRNA遺伝子の配列解析を、新たに構築したPCR-RFLP法を利用した口腔内細菌分類法を用いて行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
新生児の口腔内細菌叢および母乳の細菌叢の解析がおおむね予定通りに進行しており、その成果の一部を論文として公表できたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度に引き続き新生児口腔内細菌叢の経時的な解析を進め、新生児口腔dysbiosisがどのように生じていくかを、優勢を占める細菌の推移に着目して探求する。研究成果を学会にて公表し、客観的意見を取り入れてブラッシュアップしていく予定である。
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| Causes of Carryover |
細菌叢解析に関わる実験プロトコルの一部を変更したため、当初に予定していたよりも消耗品関連の支出が少なくなり、次年度使用額が生じた。未使用額分は次年度に引き続き行う細菌叢解析費用に充てる予定である。
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Research Products
(6 results)
