2021 Fiscal Year Research-status Report
Development of therapeutic application of beating cardiomyocytes derived from human adipose tissue for treating heart failure
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21K12681
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
高島 伸一郎 金沢大学, 附属病院, 特任助教 (60547165)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
薄井 荘一郎 金沢大学, 附属病院, 講師 (50507043)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 皮下脂肪組織間質細胞 / 拍動心筋分化 / 再生治療 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の学術的な「問い」は、「SVFに心筋誘導遺伝子Mef2cを導入したMef2c強発現SVFの投与が慢性虚血性心不全を改善させるか」、また「ヒトSVFもMef2cの導入により拍動心筋細胞に分化するか」である。
検討1. ヒト臨床皮下脂肪サンプルを用いて、ヒトSVFを拍動心筋細胞に分化誘導させる方法を確立する。
待機外科手術患者20例を対象に、手術時に生じた余剰皮下脂肪を採取。コラゲナーゼ処理ならびに遠心分離によりヒトSVFを得る。培養ディッシュにSVFを播種後、第5日目にレンチウイルスベクターを用いて、“心筋誘導遺伝子”MEF2Cを導入。28日後に分化誘導された「ヒト拍動心筋」特性について解析を行う。前年度は4例の患者から皮下脂肪を採取し検討を行った。今年度も引き続き症例を積み重ねていく予定である。
検討2.ラット慢性虚血性心不全モデルにおける“心筋分化誘導遺伝子導入”SVF投与の心機能改善効果を明らかにする。
αMHC-GFP Tgマウスの皮下脂肪からSVFを採取し、in-vitro で①PBS, ②SVF,③SVF+Mef2cの3群に分け、細胞播種後第5日目にそれぞれの「心筋分化誘導遺伝子」をレンチウイルスベクターを用いて導入する。day 10に回収、genetically-primed SVFを得る。野生型ラットに虚血再灌流モデルを作成し、4週後にgenetically-primed SVFを心筋虚血リスク領域の心筋内に直接投与する。細胞投与４週、８週後に心機能評価、組織評価を行い、心筋分化誘導遺伝子導入SVFの心機能改善効果、ホストにおける移植後in-vivo心筋分化効率を評価する。令和３年度は他施設より供与を受けたαMHC-GFP Tgマウスの繁殖がうまくいかず実験用マウスが確保できなかった。今年度は予定通り実験を行える見込みである。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
動物実験に使用する予定であった遺伝子改変マウス（他施設より供与を受けたαMHC-GFP Tgマウス）の繁殖がうまくいかず実験用マウスが確保できなかった。すでに当該マウスの再供与を受け、現在繁殖中である。今年度は予定通り実験を行える見込みである。
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| Strategy for Future Research Activity |
前年度研究の進捗が遅れた分、研究代表者の本研究分のエフォートを増やして推進する。
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| Causes of Carryover |
実験に使用予定であった遺伝子改変マウスの準備が遅れたことにより予定していた実験が行えなかったため、使用額が予定額を下回った。行えなかった分の実験を次年度に実施する予定である。
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Research Products
(1 results)
