野生株間比較によるコウモリ由来オルソレオウイルスの病原性発現機構の解明

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K14970
• Research Institution: Tokyo University of Agriculture and Technology
• Principal Investigator: 播磨 勇人 東京農工大学, (連合)農学研究科(研究院), 助教 (70805407)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: ネルソンベイオルソレオウイルス / 病原性 / 遺伝子改変技術

Outline of Annual Research Achievements

コウモリ由来のネルソンベイオルソレオウイルス（NBV）はヒトに呼吸器疾患を引き起こす新しい人獣共通感染症の原因ウイルスであり、そのウイルス学的性状はまだ不明な点が多い。本研究では、日本の輸入症例から分離されたNBV臨床株（Miyazaki-Bali/2007株）とザンビアのコウモリから分離されたNBV野生株（Nachunsulwe-57株）の2つのNBV野生株間の病原性の差異を利用して、NBVの病原性を規定するウイルス因子を同定することを目的としている。昨年度実施した病原性スクリーニングにより、病原性を規定するウイルス因子が複数同定されたため、Nachunsulwe-57株の複数のウイルス分節をMiyazaki-Bali/2007株由来分節に交換した遺伝子再集合ウイルス（reassortant NBV）を作成し、病原性解析を実施した。その結果、作製したreassortant NBV の病原性が高病原性株であるMiyazaki-Bali/2007株と同程度であり、これらの同定したウイルス因子はNBVの主要な病原性因子であることが示唆された。病原性スクリーニングによって同定したウイルス因子の内これまでNBVの病原性因子として認識されていなかったものを研究対象に設定し、病原性に重要な遺伝子領域を決定するための解析を開始した。また、同定した病原性を規定するウイルス因子に検出用のタグを付与した組換えウイルスを作成し、ウイルス因子と相互作用する宿主因子を探索するための解析に着手したが、組換えウイルスの作成には至っておらず、次年度も検出用タグの付与方法（種類や導入位置など）を変更して組換えウイルスの作出を行う。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

研究代表者が2022年4月に東京農工大学に異動したことに伴い、東京農工大学にて遺伝子組換えNBV作出及び組換えNBVの細胞・動物接種に関する実験の拡散防止措置について、文部科学大臣の確認を受ける必要があった。そのため、承認を受けるまでの間、本研究が制限された。そのため計画にやや遅れが生じている。

Strategy for Future Research Activity

昨年度に引き続き、病原性に重要な遺伝子領域を決定するため、各ウイルス分節において株間で相同置換による変異を導入した組換えNBVの病原性解析に実施する。また、ウイルス因子と相互作用する宿主因子を探索するための解析を進める。

Research Products

• [Int'l Joint Research] ザンビア大学獣医学部(ザンビア)
  • Country Name: ZAMBIA
  • Counterpart Institution: ザンビア大学獣医学部
• [Journal Article] Isolation and Characterization of Distinct Rotavirus A in Bat and Rodent Hosts (2023)
  • Author(s): Kishimoto M, Kajihara M, Tabata K, Itakura Y, Toba S, Ozono S, Sato Y, Suzuki T, Ito N, Changula K, Qiu Y, Mori-Kajihara A, Eto Y, Harima H, Mwizabi D, Hang'ombe BM, Hall WW, Takada A, Orba Y, Sawa H
  • Journal Title: Journal of Virology Volume: 97 Pages: e0145522
  • DOI: 10.1128/jvi.01455-22
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Detection of Old and New World Relapsing Fever Borreliae in Ornithodoros Ticks Collected from Warthog Burrows in Zambia (2023)
  • Author(s): Qiu Yongjin、Chambaro Herman M.、Sato Kozue、Squarre David、Simulundu Edgar、Kajihara Masahiro、Changula Katendi、Simbotwe Manyando、Harima Hayato、Ndebe Joseph、Moonga Ladslav、Nakao Ryo、Takada Ayato、Hang’ombe Bernard Mudenda、Sawa Hirofumi、Kawabata Hiroki
  • Journal Title: Microorganisms Volume: 11 Pages: 200
  • DOI: 10.3390/microorganisms11010200
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Current status and molecular epidemiology of rabies virus from different hosts and regions in Malawi (2023)
  • Author(s): Kainga H, Chatanga E, Phonera MC, Kothowa JP, Dzimbiri P, Kamwendo G, Mulavu M, Khumalo CS, Changula K, Chambaro H, Harima H, Kajihara M, Mkandawire K, Chikungwa P, Chulu J, Njunga G, Chitanga S, Mubemba B, Sasaki M, Orba Y, Qiu Y, Yamagishi J, Simulundu E, Takada A, Namangala B, Sawa H, Muleya W
  • Journal Title: Archives of Virology Volume: 168 Pages: 61
  • DOI: 10.1007/s00705-022-05635-z
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Isolation and characterization of an orthoreovirus from Indonesian fruit bats (2022)
  • Author(s): Intaruck Kittiya、Itakura Yukari、Kishimoto Mai、Chambaro Herman M.、Setiyono Agus、Handharyani Ekowati、Uemura Kentaro、Harima Hayato、Taniguchi Satoshi、Saijo Masayuki、Kimura Takashi、Orba Yasuko、Sawa Hirofumi、Sasaki Michihito
  • Journal Title: Virology Volume: 575 Pages: 10～19
  • DOI: 10.1016/j.virol.2022.08.003
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] An unusually long Rift valley fever inter-epizootic period in Zambia: Evidence for enzootic virus circulation and risk for disease outbreak (2022)
  • Author(s): Chambaro Herman M.、Hirose Kazuyo、Sasaki Michihito、Libanda Brigadier、Sinkala Yona、Fandamu Paul、Muleya Walter、Banda Fredrick、Chizimu Joseph、Squarre David、Shawa Misheck、Qiu Yongjin、Harima Hayato、Eshita Yuki、Simulundu Edgar、Sawa Hirofumi、Orba Yasuko
  • Journal Title: PLOS Neglected Tropical Diseases Volume: 16 Pages: e0010420
  • DOI: 10.1371/journal.pntd.0010420
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Presentation] Isolation and Characterization of a Nelson Bay Orthoreovirus from an Egyptian Fruit Bat in Zambia (2022)
  • Author(s): Hayato Harima、Masayuki Saijo、Bernard M Hang’ombe、Hirofumi Sawa
  • Organizer: 14th International dsRNA Virus Symposium
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] ザンビアのコウモリにおけるネルソンベイオルソレオウイルスの保有調査および分離ウイルスの病原性比較解析 (2022)
  • Author(s): 播磨 勇人、佐々木 道仁、大場 靖子、邱 永晋、Katendi Changula、梶原 将大、Edgar Simulundu、谷口 怜、高田 礼人、西條 政幸、Bernard M. Hang’ombe、澤 洋文
  • Organizer: 第165回日本獣医学会学術集会