2023 Fiscal Year Annual Research Report
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21K14974
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| Research Institution | Osaka Metropolitan University |
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Principal Investigator |
金城 綾二 大阪公立大学, 大学院獣医学研究科, 特任助教 (00827941)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | ネコ / iPS細胞 / bFGF / LIF / 培養条件 / 胚体内胚葉 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
申請者はこれまでの研究において、ヒトやイヌにおけるiPS細胞の培養条件を参考とし、ネコiPS細胞の作製を行ってきた。その結果、高い分化能と増殖能を有するネコiPS細胞が作製可能な培養条件を明らかにした。本手法で作製したネコiPS細胞は未分化マーカーを発現し、継続的な培養を行うことが可能であった。さらにin vitroで様々な細胞に分化することが可能であった。一方、本細胞の作製時には他種の細胞と共培養する手法（共培養系）を採用していた。共培養系はiPS細胞の培養・維持に必要な様々な成長因子や細胞外基質の分泌、細胞間接着シグナルの発生などの多くの利点があり、iPS細胞の培養時に多く使用されてきた。しかしながら、iPS細胞の分化誘導を行う際には、細胞分化には不要な成長因子や細胞外基質の分泌、細胞間接着シグナルの発生が生じてしまう。その結果、不十分な分化誘導や意図しない細胞種への分化誘導が生じるなどの欠点が考えられる。
そこで本研究課題では、他種の細胞との共培養を必要としない、ネコiPS細胞の培養条件について検討を行った。その結果、培地や添加因子に改良を加えることにより、共培養系で作製したネコiPS細胞であっても、ネコiPS単独での維持が可能な培養条件を導き出すことに成功した。また、iPS細胞作製の際には、獣医療では一般的に実施されている去勢手術で摘出した精巣を活用し、猫への侵襲が少ない手法による親細胞の採取を行った。
さらに作製したネコiPS細胞を分化誘導培地で培養することにより、膵島細胞の分化への初期段階である胚体内胚葉の分化マーカーを発現する細胞群へと変化した。
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