2022 Fiscal Year Annual Research Report
Class A CpGオリゴDNAナノカプセルを用いた経口粘膜アジュバントの開発
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21K14997
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
山本 祥也 広島大学, 統合生命科学研究科(生), 助教 (90825845)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | Class A CpGオリゴDNA / DNanocap / 経口粘膜アジュバント / 免疫グロブリンA / マウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
免疫機能性核酸として知られるCpGオリゴDNA（CpG ODN）は感染症やがんの予防・治療におけるアジュバント（免疫増強因子）としての利用が期待されている。本研究では、胃酸や消化酵素からCpG ODNを保護するDNAナノカプセル（DNanocap）と腸管粘膜免疫応答を増強するClass A CpG ODNを組み合わせ、感染症に対する経口粘膜アジュバントの創製を目指した。
まず、卵白アルブミン（OVA）経口感作モデルを用いて、Class A CpG ODNを包摂したDNanocap（CpG-Acap）のアジュバント活性を解析した。生理食塩水（PBS）あるいは同量のカプセル単独（cap）を与えたマウスと比較して、CpG-Acapを与えたマウスにおける糞便OVA特異的IgA量および血清OVA特異的IgG量の増加は認められず、抗原特異的免疫応答に対するアジュバント活性はなかった。一方で、CpG-Acapを与えたマウスにおける糞便中の分泌型IgA量は、経口投与の14日目に有意に増加し、35日目まで効果が持続した。また、この機構を解析したところ、7および14日目に解剖したマウスの盲腸において、分泌型IgA量の増加が認められた。加えて、各種腸管組織における分泌型IgA関連因子の遺伝子発現量をリアルタイム定量PCR法で解析したが、上述した結果との相関は認められなかった。
次に、6FAM標識したCpG-Acapを用いて体内動態と分布を解析したが、体内バックグラウンドが高く6FAM標識CpG-Acapとの見分けがつかなかったため、期待した成果を得ることができなかった。最後に、CpG-Acapの急性毒性の検証を実施ところ、個体外観、体重・飲水量・飼料量、血液の生化学的分析項目、各組織における傷害の有無に変化は見られなかった。
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