2023 Fiscal Year Annual Research Report
Exploration of adjuvant-active substances derived from extracellular membrane vesicles
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21K15254
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
河野 健一 京都大学, 薬学研究科, 助教 (70732874)
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2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 曲率認識ペプチド / 細胞外小胞 / アジュバント / 免疫活性 / 腸内細菌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
様々な細胞から恒常的に分泌される細胞外小胞(EV)の生物学的意義は長らく不明とされてきた。近年の研究で、EVには免疫細胞を活性化させる効果があると分 かってきたが、細胞のEV取込み機構やEVの内包物放出機構、そして免疫活性中心の物質情報に関して、分子レベルでの解析データは極めて限られている。本研究 では、EVによる細胞の免疫活性化機序を解明し、EV由来の免疫増強因子をアジュバントへ応用する事を研究目的とする。
既存手法では菌体からのEV単離に多くの課題があったことから、まずpH制御による細胞外小胞（EV）の新規単離法、Extracellular-Vesicle Catch-and-Release isolation System（EV-CaRiS）を開発した。既存手法の超遠心分離法と比べても1/3以下の時間で3倍高いEV収量が得られ、新規EV単離法の有用性を実証した。次に、アジ腸内細菌に由来するEVを用いて分化誘導したM1マクロファージとM2マクロファージを刺激したところ、炎症誘発性サイトカインと抗炎症性サイトカインの顕著な分泌が見られた。また、ポリリポ多糖による免疫誘導でないことを証明するために、コントロールとしてポリリポ多糖に特異的に結合する抗生物質を共存させてもEVによる免疫応答にほとんど変化が見られなかったことから、EVの内包分子による結果であることが明らかになった。なお、EVによる免疫応答実験は分化誘導マクロファージに対して細胞毒性を示さない濃度で行った。現在、さらなる詳細解析のために、EVを構成成分ごとに分離して、免疫応答を引き起こす責任因子の特定を引き続き行なっている。
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