2022 Fiscal Year Annual Research Report
活性型ビタミンKプロドラッグの肝細胞癌送達に寄与するトランスポーターの特定
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21K15288
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| Research Institution | Fukuoka University |
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Principal Investigator |
瀬戸口 修一 福岡大学, 薬学部, 講師 (80826032)
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2021-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | ビタミンK / プロドラッグ / トランスポーター / 肝細胞癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ビタミンK2（VK）は骨粗鬆症治療薬としての実績から、きわめて生命予後の悪い肝細胞癌に対する安全な再発予防薬として期待されたが、大規模臨床試験では有効性を確立できなかった。申請者らは、VKが持つ抗がん効果は還元型VK（VKH）の肝細胞癌への効率的な送達によってもたらされると仮説を立てた。VKHは易酸化性で直接使用できないため、エステル型プロドラッグとし、このVKHプロドラッグが肝細胞癌細胞に効率よく取込まれ、細胞内再変換によってVKHを送達し、天然型VKよりも高い増殖抑制効果を示すことをこれまで明らかにした。もしHCC特異的な取込みが観察されればより安全な候補化合物として期待できる。本研究では当該プロドラッグの細胞取込み挙動の解明を目的とした。HCC細胞にDCP陽性PLC/PRF/5細胞とDCP陰性SK-Hep-1細胞を用いた。細胞内薬物量の測定はLC-MS/MSを用いた。当該プロドラッグの取込み速度はMichaelis-Mentenモデルに従い、プロドラッグは天然型よりも顕著に高い速度で取り込まれた。ビタミンK1とK2で比較したところ、細胞内の取込み速度は誘導体と天然型のいずれもK2の方が有意に高かった。また、プロドラッグの取込み速度は保温温度を低下させるにつれ低下した。細胞内取込みにおいてカチオン性修飾基と側鎖の影響が大きいと考えられた。取込みに温度依存性があることから能動輸送の可能性が示唆された。さらに、種々のトランスポーター阻害剤によるプロドラッグ取込みへの影響を確認したところ、小腸トランスポーターNPC1L1の阻害剤であるエゼチミブによって有意に阻害されること見出した。しかし、NPC1L1をノックダウンさせたHEK293細胞へのプロドラッグの取込みは変化しなかった。今後はプロドラッグの小腸上皮様細胞での取込み評価とエンドサイトーシスの寄与について検討する。
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