臨床検査への応用に向けたトータルネットコレステロール引き抜き能評価法の開発

2023 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21K15641
• Research Institution: Teikyo University
• Principal Investigator: 亀田 貴寛 帝京大学, 医療技術学部, 講師 (80758558)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 高比重リポタンパク / 粥状動脈硬化 / コレステロール引き抜き能 / リン脂質引き抜き能

Outline of Annual Research Achievements

動脈硬化性疾患の予防に血中のリポ蛋白コレステロールの管理が社会的にも求められている。しかし、基準範囲にも関わらず心血管イベントを引き起こす残余リスクの存在が新たに注目され、現在、リポ蛋白をターゲットにした治療・予防戦略は「量から質」への転換期を迎えている。HDLが担う動脈硬化に対する多彩な機能として、マクロファージなどの末梢細胞からのコレステロール引き抜き能（CEC）、抗酸化能、抗炎症作用、内皮機能保護作用、抗血栓作用などが示されている。特にCECはHDLコレステロールより優れた心血管疾患のリスクマーカーとして世界的に期待されている。一方で、HDLは病態や炎症によって化学的修飾を受けることが知られており、我々はMyeloperoxidaseによる酸化修飾がHDLの一部の抗動脈硬化機能を減弱させることを報告した。これらのリポタンパクの修飾の影響と並行して、そのCECを測定することは粥状動脈硬化による心血管疾患のリスク評価に特に有用であると期待されている。我々は蛍光標識コレステロールを用いた固相化リポソーム結合ゲルビーズ（immobilized liposome-bound gel beads;ILG)法によるCEC測定法を確立した。
ILG法は臨床現場で実施可能であるが、ビリルビンがCEC値に正の誤差をもたらすことが明らかになった。ILG法の測定波長域の設定でビリルビンが蛍光を発することがわかった。励起波長を変更することで、ビリルビンによる陽性誤差を約70％改善することができた。さらに、ビリルビンオキシダーゼを利用することで、CECの偽高値を約80％改善することができた。蛍光標識コレステロールを用いたCEC測定においてビリルビンの影響を回避することで、ILG法を用いたCEC評価の改善に成功した。

Research Products

• [Journal Article] Characterization of novel truncated apolipoprotein A-I in human high-density lipoprotein generated by sequential treatment with myeloperoxidase and chymase (2024)
  • Author(s): Lai Shao-Jui、Kameda Takahiro、Morita Maasa、Yamagata Yuka、Nishizaka Kaoruko、Horiuchi Yuna、Kobayashi Yukihiro、Usami Yoko、Liu Jun-Jen、Kasama Takeshi、Tozuka Minoru、Ohkawa Ryunosuke
  • Journal Title: Biochimie Volume: 218 Pages: 34～45
  • DOI: 10.1016/j.biochi.2023.09.024
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Decreased rate of blood donors with high ABO antibody titers in Japan and the underlying factors: Comparisons between 2010 and 2021 (2023)
  • Author(s): Mikame Masamichi、Tsuno Nelson Hirokazu、Miura Yoshino、Kitazaki Hideaki、Uchimura Daisuke、Miyazaki Toru、Miyagi Toru、Onodera Takayuki、Ohashi Wataru、Kameda Takahiro、Ohkawa Ryunosuke、Kino Shuichi、Muroi Kazuo
  • Journal Title: Transfusion and Apheresis Science Volume: 62 Pages: 103812～103812
  • DOI: 10.1016/j.transci.2023.103812
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Anti-A and anti-B titers, age, gender, biochemical parameters, and body mass index in Japanese blood donors (2023)
  • Author(s): Mikame M.、Tsuno N.H.、Miura Y.、Kitazaki H.、Uchimura D.、Miyagi T.、Miyazaki T.、Onodera T.、Ohashi W.、Kameda T.、Ohkawa R.、Kino S.、Muroi K.
  • Journal Title: Immunohematology Volume: 39 Pages: 155～165
  • DOI: 10.2478/immunohematology-2023-023
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Variation in presepsin and thrombomodulin levels for predicting COVID-19 mortality (2023)
  • Author(s): Yamazaki Azusa、Nukui Yoko、Kameda Takahiro、Saito Ryoichi、Koda Yuki、Ichimura Naoya、Tohda Shuji、Ohkawa Ryunosuke
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: 13 Pages: －
  • DOI: 10.1038/s41598-023-48633-0
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Improvement in bilirubin influence on cholesterol efflux capacity evaluation using the immobilized liposome-bound gel beads method (2023)
  • Author(s): Miyakoshi Tsunehiro、Mutsuda Yume、Horiuchi Yuna、Kameda Takahiro、Tozuka Minoru、Ohkawa Ryunosuke
  • Journal Title: Bioscience Reports Volume: 43 Pages: －
  • DOI: 10.1042/BSR20230393
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] Association between CEC measured by immobilized liposome-bound gel beads method and the size of lipid-rich coronary artery plaque. (2023)
  • Author(s): Miyakoshi T., Horiuchi Y., Araki M., Yonetsu T., Watanabe M., Nakamura M., Kameda T., Yoshimoto A., Ichimura N., Tohda S., Tozuka M., Sasano T., Ohkawa R.
  • Organizer: Scientific Session of the American Heart Association 2023.11.09 Philadelphia
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Search for standardizable references in cell-free cholesterol efflux assay using immobilized liposome-bound gel beads. (2023)
  • Author(s): Horiuchi Y., Kameda T., Ogura M., Miida T., Tozuka M., Ohkawa R.
  • Organizer: the 12th International Congress on Lipid & Atherosclerosis with Asia-Australia Vascular Biology Meeting (ICoLA 2023 in conjunction with AAVBM) 2023.09.15 Seoul
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Application of bilirubin oxidase for improvement of false positive error caused by bilirubin on cholesterol efflux capacity assay by immobilize liposome-bound gel beads method. (2023)
  • Author(s): Miyakoshi T., Mutsuda Y., Horiuchi Y., Kameda T., Tozuka M., Ohkawa R.
  • Organizer: American Association for Clinical Chemistry (AACC) 2023 AACC Annual Scientific Meeting & Clinical Lab Expo 2023.07.24 Anaheim
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Usefulness of presepsin and thrombomodulin measurements for predicting COVID-19 mortality. (2023)
  • Author(s): Yamazaki A., Nukui Y., Kameda T., Saito R., Koda Y., Ichimura N., Tohda S., Ohkawa R..
  • Organizer: American Association for Clinical Chemistry (AACC) 2023 AACC Annual Scientific Meeting & Clinical Lab Expo 2023.07.24 Anaheim
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Correlation of ABO antibody titers with physiological/biochemical parameters in Japanese blood donors, and comparison between donors of 2010 and 2021. (2023)
  • Author(s): Masamichi Mikame, Nelson-Hirokazu Tsuno, Yoshino Miura, Hideaki Kitazaki, Daisuke Uchimura, Toru Miyagi, Toru Miyazaki, Takayuki Onodera, Wataru Ohashi, Takahiro Kameda, Ryunosuke Ohkawa, Shuichi Kino, Kazuo Muroi.
  • Organizer: The 33rd Regional ISBT Congress in Gothenburg, Sweden, from June 17-21.
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Usefulness of Apolipoprotein B-Depleted Serum in Paraoxonase 1 Assessment. (2023)
  • Author(s): Kawaguchi R., Kameda T., Yoshimoto A., Ohkawa R..
  • Organizer: Worldlab-Euromedlab Roma 2023 2023.05.22 Roma
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] HDLサブクラスおよび冠動脈内プラークのサイズと無細胞系測定法によるコレステロール引き抜き能の関連. (2023)
  • Author(s): 宮腰 恒広，堀内 優奈，荒木 誠，米津 太志，渡部 芽以，中村 元紀，亀田 貴寛，吉本 明，市村 直也，東田 修二，戸塚 実，笹野 哲郎，大川 龍之介.
  • Organizer: 第70回日本臨床検査医学会学術集会 2023.11.18 長崎
• [Presentation] 血清アミロイドA修飾低比重リポタンパク(SAA-LDL)における抗酸化能の解析． (2023)
  • Author(s): 亀田貴寛，加柴美里，川口莉奈，大川龍之介．
  • Organizer: 第63回日本臨床化学会年次学術集会 2023.10.27 東京
• [Presentation] LipoSEARCHシステムを用いたHDLサブクラスのアポリポタンパクの分布の解析． (2023)
  • Author(s): 波木井優奈，山崎あずさ，川口莉奈，吉本明，亀田貴寛，高橋純一郎，岡崎三代，横山信治，藍真澄，大川龍之介．
  • Organizer: 第63回日本臨床化学会年次学術集会 2023.10.27 東京
• [Presentation] 血清中アポリポタンパク複合体apoA-I/apoA-IIヘテロダイマー測定法の改良と性能評価． (2023)
  • Author(s): 孫成満，亀田貴寛，大川龍之介．
  • Organizer: 第63回日本臨床化学会年次学術集会 学生シンポジウム 2023.10.28 東京
• [Presentation] 反応過程近似解析ツールMiRuDaのさらなる有用性の検討 －鉄測定における反応非収束の事例－． (2023)
  • Author(s): 中村元紀，渡部芽衣，井口晃弘，大野一彦，亀田貴寛，市村直也，東田修二，大川龍之介．
  • Organizer: 第63回日本臨床化学会年次学術集会 2023.10.28 東京
• [Presentation] 加温処理による血清中HDL構造変化と細胞法および無細胞系測定法を用いたコレステロール引き抜き能の関係の解析． (2023)
  • Author(s): 宮腰恒広，山崎あずさ，川口莉奈，渡部芽以，堀内優奈，亀田貴寛，吉本明，市村直也，東田修二，戸塚実，大川龍之介．
  • Organizer: 日本医療検査科学会第55回大会 2023.10.6横浜
• [Presentation] THP-1 細胞と BODIPY 標識コレステロールを用いたABC トランスポーター A1 依存的コレステロール引き抜き能評価法におけるコレステロール添加量に関する検討. (2023)
  • Author(s): 秋山 葉菜恵, 宮腰 恒広,10.6 川口 莉奈, 亀田 貴寛, 吉本 明, 大川 龍之介.
  • Organizer: 第17回日本臨床検査学教育学会学術大会 2023.08.24 奈良
• [Presentation] ホモシステインチオラクトン添加血清におけるパラオキソナーゼ 1 の評価. (2023)
  • Author(s): 川口 莉奈, 亀田 貴寛, 吉本 明, 大川 龍之介.
  • Organizer: 第17回日本臨床検査学教育学会学術大会 2023.08.23 奈良
• [Presentation] LDLコレステロール濃度算出におけるリポ蛋白(a)の影響. (2023)
  • Author(s): 山崎 あずさ，横山 信治，岡崎 三代，藍 真澄，三宅 修司，高橋 純一郎，亀田 貴寛，市村 直也，東田 修二，大川龍之介.
  • Organizer: 第55回日本動脈硬化学会総会・学術集会 2023.07.26
• [Presentation] COVID-19患者のプレセプシン測定における腎機能の影響. (2023)
  • Author(s): 山崎 あずさ，貫井 陽子，亀田 貴寛，甲田 祐樹，市村 直也，齋藤 良一，東田 修二，大川 龍之介.
  • Organizer: 第31回日本臨床化学会関東支部総会 2023.06.03
• [Presentation] 献血者における抗A・抗B抗体価 低下の調査～2010年と2021年の比較および生化学検査結果・BMIとの相関～. (2023)
  • Author(s): 三瓶雅迪, 三浦佳乃, 北﨑英晃, 内村大祐, 宮崎 孔, 宮城 徹, 小野寺孝行, 大橋 恒, 亀田貴寛, 大川龍之介, 津野寛和, 紀野修一, 室井一男.
  • Organizer: 第71回 日本輸血・細胞治療学会 2023.5.13 千葉