2022 Fiscal Year Research-status Report

疾患モデル-臨床検体-データベースを用いたGAL3BPアルツハイマー病治療法開発

Research Project

Project/Area Number	21K15697
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	関恒慶神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (10878424)
Project Period (FY)	2021-04-01 – 2024-03-31
Keywords	GAL3BP / アルツハイマー病 / Aβ
Outline of Annual Research Achievements	現在、GAL3BP発現トランスジェニックマウスを作出し、ADモデルマウスAPPNL-G-F/NL-G-Fマウス（Saito et al, Nature Neurosci 2014：理研BRCより購入）と掛け合わせている。作成中の二重変異マウス（ホモ）の脳内でのAβ産出量（ELISA法）、脳標本でのAβ沈着量（免疫染色法）指標に、GAL3BPのAβ産出抑制活性をin vivo で評価を続けている。神経病理は、神経炎症とシナプス変性を指標に、また、認知機能については、学習・記憶、社会行動に関するマウス行動解析試験（バーンズ迷路、T字型迷路）を実施し評価している。ヒト生体内でのGAL3BPのAβ産出機序への影響の十分な解明のため、アルツハイマー病患者の血液を収集し、血液中のGAL3BPの測定（ELISA法）を行い、年齢、病期、症状を含めて特徴、差異を評価することでバイオマーカーとしての可能性を検証している。 NCBI GEO(Gene Expression Omnibus)はNCBIが提供、維持管理している遺伝子発現情報データベースであり、70万以上のプロファイルが利用できる。誰でも利用できるパブリックな実験データセットを利用して、ウェブ上で実行できる様々な遺伝子発現データ解析を駆使することによって、標的であるGAL3Bの発現量を変化させる食品、環境、薬剤の候補（現在、ポリフェノールやラッカイン酸、外傷）を選択し、それらを、アルツハイマー病モデル細胞：H4APPswに投与、環境調整し、細胞培地内でのGAL3BPの発現（遺伝子発現、タンパク）変化やAβ産出量（ELISA法）の測定を行っている。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 計画を遂行中だが、コロナ禍も含め、臨床業務の増大など、時間や人手の不足といった、当初予想していなかった状況もあり、予定よりもやや遅れた研究進捗となっている。また、GAL3BP、Aβの新規評価方向の手技会得にも時間がかかってしまった。
Strategy for Future Research Activity	引き続き、GAL3BP発現トランスジェニックマウスを作出し、ADモデルマウスAPPNL-G-F/NL-G-Fマウス（Saito et al, Nature Neurosci 2014：理研BRCより購入）と掛け合わせている。作成中の二重変異マウス（ホモ）の脳内でのAβ産出量（ELISA法）、脳標本でのAβ沈着量（免疫染色法）指標に、GAL3BPのAβ産出抑制活性をin vivo で評価を続けていく。神経病理、認知機能についても評価を続けていく。ヒト生体内でのGAL3BPのAβ産出機序への影響の十分な解明のため、アルツハイマー病患者の血液を収集し、血液中のGAL3BPの測定（ELISA法）や、剖検脳でのGAL3BPのAβの関係を評価していく。NCBI GEO(Gene Expression Omnibus)はNCBIが提供、維持管理している遺伝子発現情報データベースを利用して、標的であるGAL3Bの発現量を変化させる食品、環境、薬剤の候補をさらに選択し（現在、ポリフェノールやラッカイン酸、外傷を候補として）、それらをアルツハイマー病モデル細胞を利用して評価していく。
Causes of Carryover	計画を遂行中だが、コロナ禍も含め、臨床業務の増大など、時間や人手の不足といった、当初予想していなかった状況もあり、予定よりもやや遅れた研究進捗となっている。また、GAL3BP、Aβの新規評価方向の手技会得にも時間がかかってしまった。そのため、次年度使用額が生じた。