2022 Fiscal Year Research-status Report
統合失調症死後脳におけるプロリン代謝経路のメタボローム解析
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21K15715
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| Research Institution | Fukushima Medical University |
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Principal Investigator |
長岡 敦子 福島県立医科大学, 医学部, 博士研究員 (20844632)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 統合失調症 / 死後脳 / プロリン / 1－プロリン－5－カルボン酸 / オルニチン / グルタミン酸 / アミノ酸 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究に用いる死後脳試料は異なる二施設に保管されたものであるため、施設による相違という定量化できない様々な交絡因子の積み重ねで生じるタンパク質発現量に対する影響について評価を行った。まず二施設で保管された死後脳の人口統計学的因子について比較し、次にハウスキーピング分子の1つであるglyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)と、脳内に広く発現するglial fibrillary acidic protein（GFAP）の前頭前野（PFC）、上側頭回（STG)における発現量をELISA法を用いて測定し、二施設間で有意差の見られた交絡因子を加味し統計的に比較し、有意な差は見られないことを確認した。その後論文化し投稿中である。プロリン代謝経路の統合失調症病態への関与に注目し、同脳試料を用いてプロリンがグルタミン酸に代謝される最終段階に関わる酵素であるAldehyde Dehydrogenase 4 Family Member A1 (ALDH4A1)が統合失調症死後脳で著明な増加がみられること、プロリン代謝経路内の酵素で統合失調症との関連が注目される分子であるProline oxidase（PRODH）やProlidase（PEPD）について調べ、STGにおけるPRODH発現量が統合失調症群において有意に低く、PFCにおけるPRODH、PFCとSTGにおけるPEPDに有意な変化はないことがわかった。プロリン代謝経路で代謝される４つのアミノ酸（およびイミノ酸）すなわちプロリン、1－プロリン－5－カルボン酸（P5C）、オルニチン、グルタミン酸の測定系の構築のため、ウシの脳を用いてHPLC法でアミノ酸の測定を行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
質量分析器の調整が完了し試運転を行ったところ、真空ポンプが故障し、その後の修理に時間を要し質量分析器によるアミノ酸測定系の構築については当初の予定よりやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
アミノ酸の測定については受託解析によるLC/MSMSを用いたメタボローム解析、もしくは、研究代表者が令和5年4月に福島県立医科大学から東北大学へ異動となったため、解析の選択肢として新たにガスクロマトグラフィや高感度液体クロマトグラフィを用いた方法を検討している。
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| Causes of Carryover |
使用予定であった質量分析器の故障、修理のため使用停止しており、購入予定であった試薬等のための美遺品費が残ったため。受託解析もしくはほかの方法での解析を行う際の試薬購入費として使用を検討している。
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