シングルセル解析技術を用いた胆道癌における炎症性サイトカインの病態解明

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K15930
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 石上 敬介 札幌医科大学, 医学部, 助教 (50779600)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 胆道癌 / 炎症 / サイトカイン / シングルセル

Outline of Annual Research Achievements

胆道癌は切除不能な状態で発見されることが多く，また切除不能症例に対する標準治療である多剤併用化学療法の奏効率も依然として十分ではないことから，病態の更なる解明と新規治療の開発・既存治療の最適化が急務である．申請者は，胆道癌組織および胆道癌患者血清を用いた炎症性サイトカインの発現解析およびシングルセル解析を用いて、炎症性サイトカインを介した胆道癌の進展機構の解明と診断・治療への応用を目標としている．

本年度は，胆道癌患者からの臨床情報の収集およびサンプルの収集を行った．先行文献に倣い，胆道癌組織からの細胞分離を行い，シングルセル解析やオルガノイド作成を行う計画であったが，個細胞単離の条件検討に時間を要したため，胆道癌患者由来のサンプルを用いた解析を行うことができなかった．当初，マウスを用いた解析は予定していなかったが，ヒト胆道癌組織を用いた解析は切除症例数によって研究状況が大きく左右され，またオルガノイドの樹立にも時間を要する可能性があることを考慮し，マウスモデルでの細胞単離およびオルガノイド作成についても準備を進めている．
ヒト胆道癌患者由来の血清および組織における炎症性サイトカインの発現については細胞単離を要さずに解析可能である．個々の炎症性サイトカインが胆道癌の病態に及ぼす影響については，ヒト胆道癌組織を用いた検討が計画通りに進まない場合にはマウスモデルでの解析を併用する予定であり，当初予定していた研究計画からの大幅な逸脱なく実施可能と考えている．

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

胆道癌組織からの細胞分離過程の最適化の検証に時間を要したため，胆道癌臨床検体を用いたシングルセル解析の開始が予定より遅れている．

Strategy for Future Research Activity

胆道癌組織および患者血清などの検体収集を継続し，それぞれにおけるサイトカイン発現の解析・比較を行う．また，ヒト胆道癌組織からの細胞分離ののちシングルセル解析およびオルガノイド樹立を行う予定である．胆道癌患者の糞便を用いたmicrobiome解析についても並行して行う．

Causes of Carryover

胆道癌患者からの細胞分離の条件検討に時間を要し，シングルセル解析やオルガノイド培養を実際に行うことができなかったため，各実験に使用予定であった物品費の一部を使用しなかった．条件検討が終了し次第，予定していた研究計画を実施する見込みであり，翌年度分の助成金と併せて使用する計画とする．