加齢による肝線維化進展促進に関わる新たな因子の同定とその分子学的メカニズム

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K15983
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 西村 典久 奈良県立医科大学, 医学部, 学内講師 (40790324)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: CHI3L1 / 肝星細胞 / 肝線維化 / 加齢性変化

Outline of Annual Research Achievements

CHI3L1の肝線維化に対する分子学的機序を解明する目的で、肝線維化の中心的役割を果たす肝星細胞に対する直接的作用の検討を行った。Primaryのヒト肝星細胞（HHSteC）および肝星細胞株であるLX-2を用い、組換え体CHI3L1蛋白を培養液に添加して培養し、細胞増殖や肝線維化マーカーの変化を解析した。CHI3L1を添加して培養を行うと、対照群と比較して有意に肝星細胞の細胞増殖が促進されていた。Ki67染色を行ったところ、CHI3L1刺激群ではKi67陽性細胞数が有意に上昇しており、細胞増殖の促進が裏付けられた。次にRT-PCRなどを用いて肝星細胞の活性化マーカーであるαSMA、COL1A1、TGF-B1などの発現を見てみると、CHI3L1は有意にαSMAやCOL1A1の発現を上昇させた。次に、肝星細胞におけるCHI3L1のreceptorについて検索を行うこととした。その結果、マクロファージなどの細胞において発現が認められるIL-13 receptor α2 (IL-13Ra2)が肝星細胞に発現しており、このreceptorは肝星細胞の活性化に伴って、細胞表面に発現してくることが確認された。IL-13Ra2を介したsignalingはこれまでの報告で肝星細胞の活性化を促進し、肝線維化進展に関与していることが報告されており、肝星細胞におけるCHI3L1の直接的作用はこの系を介した作用であることが示唆された。さらに、肝内におけるCHI3L1産生のトリガーとなる因子に関して、検討を行った。その結果、肝細胞にはIL-6、肝星細胞にはTNF-αが作用して各細胞からのCHI3L1産生を促進させることが確認された。以上より、CHI3L1は年齢によりその発現が上昇し、炎症性サイトカインであるIL-6やTNF-αに応答して肝線維化を促進させる因子であることが明らかとなった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

必要な実験結果はおおむね得られたため、論文作成を進めている。臨床業務との兼ね合いでやや作成が遅れているが、継続中である。

Strategy for Future Research Activity

臨床業務とのバランスを調整し、論文作成を引き続き進める予定としている。

Causes of Carryover

論文作成における推敲費、投稿費用、また学会発表などの結果報告に使用することを予定している。