ヘルパーT細胞受容体を用いた肝癌治療に関する基礎的検討

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K15994
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 玉井 利克 金沢大学, 医学系, 助教 (40782082)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: ヘルパーT細胞 / T細胞受容体 / 肝細胞癌

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、肝癌腫瘍抗原を認識するヘルパーT細胞(HTL)のT細胞受容体(TCR)を取得し、それらの中から肝癌治療に有効と考えられるTCRを選択し、ヒト肝癌治療へ応用していくための基礎的データを得ることである。本研究で取得したTCR単独もしくは、MHC(Major Histocompatibility Complex:主要組織適合性複合体)-classⅠ拘束性の肝癌関連抗原特異的なTCRと組み合わせた治療も今後期待できる。
本研究は次の手順で行う。①ペプチド特異的HTLの検出およびペプチド特異的TCR遺伝子の取得、②ペプチド特異的TCR遺伝子改変T細胞の作製と機能解析、③クローニンしたTCRを用いた癌免疫療法の基礎的検討を順に行っていく。
本年度は、ペプチド特異的HTL検出のためにMHC-ペプチドテトラマーの合成から着手した。研究者らが過去に同定したMHC-classⅡ拘束性の肝癌由来ペプチドを使ったテトラマーの合成を外注したが、1種類は不成功であったため、さらに別の1種類で依頼し合成できたものを入手することができた。現在、肝癌由来ペプチド特異的HTLのTCRを取得するために、肝がん患者の末梢血を用いて特異的リンパ球の検出を試みている。ネガティブコントロールTCRも必要であるため、市販のMHC-classⅡ拘束性ペプチドのテトラマーを用いて、並行して取得を試みている。また、MHC-ペプチドテトラマーを合成できなかったペプチドについては、クローンを作成し、それらの中からペプチド特異的なTCRを取得することを今後検討する。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

交付申請書に記載した当初の計画からみるとやや遅れている。テトラマー陽性細胞を検出できれば次のステップに進めることができる。

Strategy for Future Research Activity

まず、テトラマー陽性細胞取得に注力する。陽性細胞を取得した後には、研究計画の通りに、TCRのレパートリー解析、TCR発現ベクターの構築、同TCRをヒトリンパ球に遺伝子導入し、その機能解析を行っていく。

Causes of Carryover

外注したテトラマー合成だが、1種類目は不成功に終わり、別の1種類で合成でき入手することができた。そのため、当初のタイムラインよりやや遅れており、本年度中に予定していた額より経費が少なくなり次年度使用額が生じた。次年度は、テトラマー陽性細胞検出およびそのTCRの解析を行い、ペプチド特異的TCRの同定を行う。