2022 Fiscal Year Annual Research Report
腎糸球体でのナトリウム利尿ペプチド受容体とp38 MAPKの関連性
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21K16188
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
山田 博之 京都大学, 医学研究科, 助教 (70713650)
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2021-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | ポドサイト / p38 MAPK / ナトリウム利尿ペプチド / ANP |
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| Outline of Annual Research Achievements |
腎臓における尿の作成には、腎糸球体上皮細胞(ポドサイト)と呼ばれる終末分化細胞が重要な働きをしており、慢性腎不全の病態解明にはポドサイト障害の機序を解明することが求められる。本研究では、ポドサイト障害をナトリウム利尿ペプチド(Guanylyl cyclase-A; GC-A)およびp38 MAPKの２つに蛋白に着目して検討した。
まず、ポドサイト特異的GC-A & p38 MAPKダブルノックアウトマウスでは、高度のアルブミン尿とポドサイト障害、腎機能障害、糸球体係蹄内血栓を認めた。また糸球体のMCP-1、PAI-1、FN、TGF-βのmRNA発現量は増加し、VEGF発現量は低下していた。
次に、培養ポドサイトに対して、CRISPR/Cas9を用いてp38 MAPKノックアウト培養ポドサイトの樹立を試みた。元来、培養ポドサイトはTransfection効率が悪いことが知られている。そのため、Cas９タンパク質とguide mRNAそれぞれを発現するplasmid DNAを培養ポドサイトにTransfectionし、よりSingle Cell Cloningを行いやすい環境を作ることで、p38 MAPKノックアウト培養ポドサイトを確立した。実際、p38 MAPKノックアウト培養ポドサイトに対して、si-RNAを通じてGC-Aの発現をノックダウンさせると、PAI-1、TGF-β、FNのmRNA発現量の増加を認
め、共培養したヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）でもTGF-β、FNのmRNA発現量の増加を認めた。
以上より、ポドサイトのp38 MAPKとGC-Aはポドサイト障害において重要な働きをしており、その欠失により血管内皮細胞に障害を及ぼすと考えられる。
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[Journal Article] Intestinal Bacterial Translocation Contributes to Diabetic Kidney Disease2022
Author(s)
Linh Hoang Thuy, Iwata Yasunori, Senda Yasuko, Sakai-Takemori Yukiko, Nakade Yusuke, Oshima Megumi、Nakagawa-Yoneda Shiori、Ogura Hisayuki、Sato Koichi、Minami Taichiro、Kitajima Shinji、Toyama Tadashi、Yamamura Yuta、Miyagawa Taro、Hara Akinori、Shimizu Miho、Furuichi Kengo、Sakai Norihiko、Yamada Hiroyuki、et al.
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Journal Title
Journal of the American Society of Nephrology
Volume: 33
Pages: 1105～1119
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] 拡張型心筋症モデルマウスを用いた心腎連関の機序解明2022
Author(s)
石村 拓也 , 石井 輝 , 山田 博之 , 中川 靖章 , 大野 祥子 , 生島 昭恵 , 杉岡 清香 , 半田 貴也 , 桑原 宏一郎 , 柳田 素子 , 横井 秀基
Organizer
日本腎臓学会
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