2021 Fiscal Year Research-status Report
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21K16201
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
北村 真也 北海道大学, 大学病院, 助教 (70875161)
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2021-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | ケラチン / 有棘細胞癌 / FAM83ファミリー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
背景：皮膚有棘細胞癌は進行例では有効な治療法が乏しく、予後不良である。これまでの研究によってFAM83HやFAM83Bは皮膚表皮細胞に著明に発現していることがわかっていた。申請者らのグループはFAM83ファミリーの表皮細胞における機能に注目して、研究中である。
目的：本研究課題ではFAM83Hの皮膚有棘細胞癌における機能を解析した。
方法と結果：免疫組織化学染色では、FAM83Hは皮膚表皮細胞にて大量に発現しており、有棘細胞癌では正常表皮細胞に比べて発現が低下していた。さらに、疣贅などの皮膚良性腫瘍ではその発現は低下していなかった。次に、FAM83Hの機能を解析するためにFAM83Hノックダウン皮膚有棘細胞癌細胞(shRNA)を樹立し、コントロール細胞と比較した。その結果、ノックダウン細胞では細胞の遊走能と浸潤能が亢進していた。逆に、レトロウイルス発現によるFAM83H過剰発現細胞では、細胞の遊走能・浸潤能が低下した。分子機構の解明のために、過去の報告に基づきFAM83Hの結合分子を探索したところ、TRIM29・各種ケラチンとの結合が認められた。さらに、FAM83Hノックダウン細胞を観察したところ、ノックダウンによってケラチンの細胞内分布が核周囲に変化しており、それが細胞の遊走に関与している可能性が考えらえた（J Dermatol Sci）。
今後の予定：FAM83Hが細胞内のケラチン重合に関与しているかどうかを、電子顕微鏡的観察および分子生物学的解析をおこなっていく。他のFAM83ファミリーとの関連についても検討をおこなう。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
FAM83Hのノックダウン・過剰発現によって、細胞の表現型を認めることができたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
FAM83Hがケラチンに与える影響を、形態学的・分子生物学的手法で解析していく。
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| Causes of Carryover |
本年度は抗体などの消耗品購入が予定よりも少なくおさまった。来年度は本年度の使用しなかった分と合わせて実験を進めていく。使用計画としては、細胞培養消耗品と抗体購入費用として使用する予定である。
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