Effects of neutrophil extracellular traps (NETs) on response to cancer immunotherapy.

2022 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21K16432
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 金丸 理人 自治医科大学, 医学部, 助教 (10625544)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 好中球細胞外トラップ / 免疫療法 / ケモタキシス / 細胞障害性T細胞 / CXCL-11 / 細胞運動 / 免疫チェックポイント阻害

Outline of Annual Research Achievements

(1)健常人末梢血からCD3抗体とｒ－IL-2で培養し活性化したT細胞のCXCL-11（1000ng/ml）に対する遊走能を検討したところ、PMA活性化好中球の存在下で劇的に減少し、その変化はDNase IによるNETsの分解や、遠心分離によってNETs成分を除去しても変化はなかったが、カタラーゼ（800u / ml）で前処理するとキャンセルされた。また、活性化T細胞のplastic plate上のrandom migrationをタイムラプス動画で観察すると、PMA刺激好中球の上清の添加で劇的に抑制された。また、活性化T細胞の遊走はLPS活性化好中球によって有意に阻害されたが、NETsを除去するとその抑制は部分的に解除された。ウエスタンブロッティングにてCXCL-11はLPS刺激好中球に由来するNETsによって完全に分解されたが、DNAseIやプロテアーゼ阻害剤であるPMSFが共存でその抑制は解除阻害された。以上のことから、活性化好中球はNETsを含めた複数のメカニズムでT細胞の浸潤を抑制する作用を持つことが明らかとなった。
(2)ヒト卵巣癌におけるNETsと免疫細胞浸潤の検討
卵巣癌の48例の手術切除検体を用いて、組織切片を作成、NETsに特異的なCit-H3抗体を用いてNETsを同定するとともに、好中球、マクロファージ、リンパ球のフェノタイプとその密度を免疫染色にて検討した。CD66b(+)/citH3(+)NETsの密度と, CD3(+)/CD8 (+)T細胞の密度は逆相関することが解った(r=-0.594, p=0.013)。このことから、ヒト癌組織でのNETsの存在はエフェクターT細胞の浸潤を抑制する方向に働いていることが示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Peripheral low-density granulocytes after colorectal cancer surgery in predicting recurrence (2023)
  • Author(s): Futoh Yurie、Kumagai Yuko、Miyato Hideyo、Ozawa Hideyuki、Kanamaru Rihito、Sadatomo Ai、Ohnishi Yasuharu、Koinuma Koji、Horie Hisanaga、Yamaguchi Hironori、Lefor Alan Kawarai、Sata Naohiro、Kitayama Joji
  • Journal Title: BJS Open Volume: 7 Pages: BJSOpen zrac154
  • DOI: 10.1093/bjsopen/zrac154
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Altered intraperitoneal immune microenvironment in patients with peritoneal metastases from gastric cancer (2022)
  • Author(s): Takahashi Kazuya、Kurashina Kentaro、Yamaguchi Hironori、Kanamaru Rihito、Ohzawa Hideyuki、Miyato Hideyo、Saito Shin、Hosoya Yoshinori、Lefor Alan Kawarai、Sata Naohiro、Kitayama Joji
  • Journal Title: Frontiers in Immunology Volume: 13 Pages: 01-10
  • DOI: 10.3389/fimmu.2022.969468
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Neutrophil extracellular traps (NETs) reduce the diffusion of doxorubicin which may attenuate its ability to induce apoptosis of ovarian cancer cells (2022)
  • Author(s): Tamura Kohei、Miyato Hideyo、Kanamaru Rihito、Sadatomo Ai、Takahashi Kazuya、Ohzawa Hideyuki、Koyanagi Takahiro、Saga Yasushi、Takei Yuji、Fujiwara Hiroyuki、Lefor Alan Kawarai、Sata Naohiro、Kitayama Joji
  • Journal Title: Heliyon Volume: 8 Pages: e09730～e09730
  • DOI: 10.1016/j.heliyon.2022.e09730
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] IP-PTX+SOX療法に奏功を認めた腹膜播種陽性胃癌症例に対するconversion surgeryの成績 (2022)
  • Author(s): 金丸 理人, 山口 博紀, 髙橋 和也, 金子勇貴, 加賀谷 丈紘, 高木 徹, 松本 志郎, 倉科 憲太郎, 齋藤 心, 細谷 好則, 北山 丈二,佐田 尚宏
  • Organizer: 第84回日本臨床外科学会総会
• [Presentation] ４型スキルス胃癌・腹膜播種に対するパクリタキセル腹腔内投与（IP-PTX）併用SOX療法とConversion Surgery (2022)
  • Author(s): 金丸 理人, 山口 博紀, 髙橋 和也, 高木 徹, 倉科 憲太郎, 齋藤 心, 大澤 英之, 細谷 好則, 北山 丈二,佐田 尚宏
  • Organizer: 第77回日本消化器外科学会総会
• [Presentation] 胃癌腹膜播種における腹腔内免疫細胞の解析 (2022)
  • Author(s): 髙橋 和也, 大澤 英之, 金丸 理人, 松本 志郎, 倉科 憲太郎, 齋藤 心, 山口 博紀, 細谷 好則, 佐田 尚宏,北山 丈二
  • Organizer: 第60回日本癌治療学会学術集会
• [Presentation] Flow cytometryを用いた胃癌患者腹腔内免疫細胞の解析 (2022)
  • Author(s): 髙橋和也, 大澤英之, 金丸理人, 倉科憲太郎, 齋藤心, 山口博紀, 細谷好則, 北山丈二,佐田尚宏
  • Organizer: 第77回日本消化器外科学会総会