2022 Fiscal Year Annual Research Report
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21K16527
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| Research Institution | Kanazawa Medical University |
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Principal Investigator |
本野 望 金沢医科大学, 医学部, 講師 (30634901)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 肺癌 / 幹細胞 / スフィンゴリン脂質 / TSHZ2 / Hedgehog |
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| Outline of Annual Research Achievements |
細胞膜活性物質であるスフィンゴリン脂質の代謝酵素であるSphK1が癌浸潤部およvびcancer associated fibroblastに過剰発現していること、SphK1高発現群で予後が不良になる傾向を見出した（Clinical Pathology 2021;14:1-7）。また乳腺幹細胞の自己複製に重要と考えられるGLI1に抑制的に働くTeashirt homolog 2（TSHZ2）と肺腺癌との関係を解した。異なる腺癌細胞株でのTSHZ2の発現の差を検証するため、PC9およびA549細胞株をpDsRed-monomer-C1-TSHZ2あるいはSiRNA-TSHZ2で処理し、ウエスタンブロット法によりTSHZ2の発現を評価した。pDsRed-monomer-C1-TSHZ2で処理されたPC9細胞株ではTSHZ2の発現は亢進していたが、SiRNA-TSHZ2で処理されたA549細胞株ではTSHZ2の発現は減弱していた。次に、PC9およびA549細胞株を用い、細胞増殖・遊走・アポトーシスへの影響をCCK8アッセイおよびクローン形成アッセイにより評価した。PC9細胞株でTSHZ2を過剰発現させたところ、pDsred-monomer-C1-emptyで処理した細胞と比較して細胞増殖を著しく抑制した。さらに、pDsred-monomer-C1-TSHZ2で処理した細胞はその後14日間で100程度のクローン形成にとどまり、他と比較し著明に少なかった。また、TSHZ2発現によるアポトーシスへの影響をフローサイトメトリーで評価したところ、pDsred-monomer-C1-TSHZ2で処理したPC9細胞株ではコントロール群と比較し、アポトーシスに陥った細胞数は有意に多かった。このことから、TSHZ2の高発現群で細胞増殖が抑制され、予後が良好であることを証明した（Int J Med Sci 2021;18:1980-1989）。
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