2021 Fiscal Year Research-status Report
Peroxiredoxin6の角膜上皮障害とドライアイにおける保護効果の解明
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21K16886
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| Research Institution | Kanazawa Medical University |
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Principal Investigator |
柴田 哲平 金沢医科大学, 医学部, 助教 (70746700)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 角膜上皮障害 / ドライアイ / 角膜 / 涙液 / 酸化ストレス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
・Prdx6点眼の角膜創傷治癒への影響をみる。
白色家兎の角膜表面にN-heptanolを塗布して、角膜上皮に一定面積の上皮欠損を作成した。1日2回TAT-Prdx6(WT)、Prdx6、陰性コントロールのMut-Prdx6を点眼し、1日1回前眼部のフルオレセイン生体染色像を撮影し、角膜上皮のバリアー機能を解析するため電気抵抗値を測定、創傷治癒面積と電気抵抗値、Prdx6ノックアウトおよびPrdx6の点眼投与が創傷治癒過程におけるバリアー機能回復に与える影響を解析した。結果、TAT-Prdx6(WT)、Prdx6点眼を施行した家兎にフルオレセイン染色にてコントロールに比べて創傷治癒の促進効果があり、また電気抵抗値でもコントロールに比べて数値の正常化が速かった。
・Prdx6投与によるHS誘発性酸化ストレスにたいする角膜上皮保護効果を解析する。
培養ヒト不死化角膜上皮細胞(hTCEpi)を使用し、HS-DEDモデルとして、hTCEpiを450mOSMの培地（HS+ or-Prdx6）でPrdx6(+)（HS+Prdx6群）あるいは、Prdx6(-)（HS-Prdx6群）にてROS産生とHMOX1とCOX2の発現をみた。HS-Prdx6群では、ROS産生が増加し細胞生存率が有意に減少したが、HS+Prdx6群では、ROS産生と細胞生存率の減少が有意に抑制されていた。HS-Prdx6群では、HMOX1とCOX2発現が有意に上昇したが、HS+Prdx6群では、その発現の増加が有意に減少した結果が得られた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Prdx6投与による細胞遊走と紫外線誘発角膜上皮細胞死への影響を解析することに関しては、細胞遊走の実験は現在進行中だが角膜細胞がうまく育たないため実験は遅れ気味である。
ヒト涙液のPrdx6発現量とDEDとの関係を解析することに関しては、現在涙液採取と検体採取中であり、実験進行中である
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| Strategy for Future Research Activity |
角膜上皮細胞の育て方などは今一度論文などで培養条件など検索し、改善策を試みる。
またヒト涙液の検体採取もサンプル数をよりたくさんの患者から採取できるように試みる。
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