H19長鎖非コードRNAの作動原理に基づく核酸医薬による神経障害性疼痛治療

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K17132
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 伊藤 孝哉 東京医科歯科大学, 歯学部, 特任助教 (00880650)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 神経障害性疼痛 / シュワン細胞 / 長鎖非コードRNA / H19 / レンチウイルスベクター

Outline of Annual Research Achievements

体性感覚神経の障害に伴う神経障害性疼痛は、特に歯科麻酔領域においては三叉神経痛や
舌咽神経痛などが挙げられるが、慢性に経過し難治性で苦痛が強いため、積極的に治療する
ことが求められる。近年では、神経障害性疼痛の病態生理において、末梢神経系における神経炎症の重要性が言われている。末梢神経系のグリア細胞であるシュワン細胞も炎症性サイトカインや神経栄養因子などの様々な液性因子を産生・放出することで末梢感覚神経の感作を引き起こすとされていて、シュワン細胞においてTNF-α、IL-1β、IL-6といった炎症性サイトカインや神経成長因子(NGF) のような神経栄養因子など、感覚神経の感作を誘導する様々な炎症性物質が協調して調節されていることが知られている。
長鎖非コードRNAであるH19は様々な作動原理を通して炎症性疾患に関連し、これまでに様々な細胞腫において多くの液性因子の発現調節を担うことが報告されている。しかし、H19は幅広く炎症性物質の制御に関わるにもかかわらず、標的遺伝子の発現調節機構は個別にしか検討されていなかった。最近、申請者らは、H19がシュワン細胞で神経障害により持続的に且つ劇的に増加していることを明らかにし、更にそのシュワン細胞にレンチウイルスベクターを使用して、H19を効率的に遺伝子導入できる手法を確立した。この方法により、H19による多くの遺伝子の発現変化を網羅的に解析することを可能にし、シュワン細胞における炎症制御メカニズムを明らかにすることが期待できる。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

初代培養シュワン細胞の培養、さらにレンチウイルスベクターによるH19の遺伝子導入に時間を要した。さらに、COVID19の蔓延により研究室の立ち入りの制限があったため。

Strategy for Future Research Activity

H19を遺伝子導入した初代培養シュワン細胞からRNAを抽出し、RNAシーケンスによりmRNA
の発現変化を網羅的に解析する。その結果をもとに、バイオインフォマティクス解析（Causal network解析およびUpstream regulator解析）によりH19発現誘導で発現変化したmRNAの調節に関わる可能性のある分子を予測する。

Causes of Carryover

2021年度に、RNAシーケンスの分析を行い、その結果をもとにバイオインフォマティクス解析を行うとともにシンポジウムにおいて発表する予定であったが、RNAシーケンスの分析に使用するサンプルが未だ揃ってなく、分析を行う時期を遅らせたため、未使用額が生じた。
このため、RNAシーケンスの分析とシンポジウムの発表を次年度に行うこととし、未使用額はその経費に充てることとしたい。