2023 Fiscal Year Annual Research Report
乳歯歯髄由来間葉系幹細胞エクソソームを応用した低侵襲性顎裂部閉鎖治療の確立
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21K17186
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
阿部 崇晴 広島大学, 病院(歯), 助教 (20806682)
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2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | エクソソーム / 培養上清 / SHED / DPSC / HCEM / 骨再生 / miRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
乳歯より単離培養した間葉系幹細胞(MSC)の培養上清から抽出したエクソソームをSHED-EXs、永久歯より単離したMSCの培養上清から単離したエクソソームをDPSC-EXsとし、実験に用いた。原子間力顕微鏡での観察により粒子径は50-100 nmであった。また、エクソソームに内包されるmiRNAについて調査したところ、miR1474AやmiR326といった制御遺伝子のほか、mir448やmiR451といった血管平滑筋細胞の遊走制御を行うmiRNAが検出された。
骨髄由来間葉系幹細胞(BMSC)にSHED-ExoおよびDPSC-EXsを添加すると、エクソソームを添加することにより、有意に細胞数の増加が認められた。さらにヒト骨芽細胞(HCO)にSHED-EXsおよびDPSC-EXsを添加した結果、SHED-EXsを添加した群にて有意に細胞数の増加が認められた。また、骨分化誘導したBMSCにSHED-EXsおよびDPSC-EXsを添加し、アリザリンレッド染色により定量評価を行った結果、エクソソームの添加により、有意な骨分化が認められた。同様にHCOに各EXsを添加した結果、SHED-EXsにて有意な濃染を認めた。また、培養したBMSCにSHED-ExoおよびDPSC-Exoを添加したところ、エクソソームの添加により、有意なALPとMAPK1遺伝子発現の増加が認められた。HCOに各EXsを添加した結果、ALPのタンパク発現の上昇が認められた。
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