2023 Fiscal Year Annual Research Report
デザイン型育種プロセスの創成とインフルエンザ抵抗性ニワトリ作製への展開
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21K18186
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
西島 謙一 名古屋大学, 生命農学研究科, 教授 (10262891)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西藤 岳彦 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究部門, 部長 (00263393) [Withdrawn]
内田 裕子 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究部門, グループ長 (80442797)
佐久間 咲希 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究部門, 研究員 (00849747)
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| Project Period (FY) |
2021-07-09 – 2024-03-31
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| Keywords | ニワトリ / インフルエンザ / 感染性 / ゲノム / ゲノム編集 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
インフルエンザ特に鳥インフルエンザは世界中に蔓延している状況が続き、依然として危険な状況である。発生農場の全家禽の殺処分等の防疫措置をとることが定められており対策が必要である。本研究では、鶏が本来持つインフルエンザ耐性遺伝子を他の系統に導入することでインフルエンザ抵抗性ニワトリを作製することを最終目標としている。合わせて、望ましい形質をもたらす遺伝子を予測した上で試行錯誤によらない自由な育種を可能とするための基礎技術の開発を行った。
高病原性鳥インフルエンザ抵抗性を持つ個体が含まれる系統について原因遺伝子を解析するために、抵抗性系統と感受性系統を交配して第2世代を作出し、感染実験によって高病原性鳥インフルエンザ感受性を調べた。抵抗性個体を得られたペアから生まれた個体について、ゲノムDNAを抽出し次世代シーケンサーによりゲノム配列を決定した。連鎖解析により、高病原性鳥インフルエンザ抵抗性と高い相関を示すゲノム領域を推定することができた。この領域の中に存在が想定されるインフルエンザ抵抗性遺伝子を一つずつ破壊することで証明をすることが必要となるが、遺伝子の数は多いため解析の効率上昇が必要である。そこで、ガイドRNA発現用の小さなベクターを導入するだけでゲノム編集が可能となるCRISPR/Cas9発現トランスジェニックニワトリの作製を進めた。作製した生殖腺キメラニワトリ個体を交配することで、ユビキタスプロモーターの制御下CRISPR/Cas9を発現可能なニワトリ系統の樹立に成功した。モデル実験において効率よく遺伝子破壊が可能であることが確認された。この系統を用いて多くの遺伝子の役割を個体内で調べることで目的遺伝子の同定が可能となり、今後、様々な遺伝形質をデザインしてニワトリを改変する育種法への展開が期待される。
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