2021 Fiscal Year Research-status Report
糖鎖を利用したクライオ電子顕微鏡解析の問題克服と自然免疫受容体TLRへの応用
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21K19328
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
清水 敏之 東京大学, 大学院薬学系研究科(薬学部), 教授 (30273858)
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| Project Period (FY) |
2021-07-09 – 2023-03-31
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| Keywords | クライオ電子顕微鏡 / Orientation bias / 糖鎖 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年クライオ電子顕微鏡による単粒子解析が飛躍的に進み、数々のタンパク質構造が解析されている。しかしながら解析途中でいくつもの問題点に直面する。代表的なものはグリッド作成時のOrientation biasである。これは単粒子解析では分子がランダムに配向しなければならないが、一方向になってしまい三次元構成が困難になるという問題である。
この問題点を解決するために様々な手法が提唱されているがTLRが糖タンパク質であることを利用し、人為的なコントロールが可能である糖鎖修飾によってこの問題点を解決することを試みる。
本年度は糖鎖導入位置の検討を行う一方で、タンパク質のPEG化に代表されるタンパク質化学修飾によってOrientation biasを解決することを試みた。その結果いくつかのタンパク質で有効であることがわかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Orientation biasの解決策としてPEG化が有効であることを示した。
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| Strategy for Future Research Activity |
糖鎖導入がOrientation biasの解決に有効であるか実際に糖鎖付加部位に変異を加えることにより検証する。
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| Causes of Carryover |
機器の導入が予定より遅れ、次年度購入になったため。
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