2022 Fiscal Year Research-status Report
Analysis of airway epithelial barrier mechanism in pulmonary MAC disease
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21K20782
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| Research Institution | Toho University |
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Principal Investigator |
塩沢 綾子 東邦大学, 医学部, 助教(寄付講座) (00912966)
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| Project Period (FY) |
2021-08-30 – 2024-03-31
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| Keywords | 非結核性抗酸菌症 / 宿主応答 / 上皮バリア |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでに申請者は、去痰剤の一種であるN-acetyl-cysteine（NAC）をM.aviumに感染した気道上皮細胞およびマウスに投与すると、感染気道上皮の抗菌ペプチドの産生が誘導され、菌数が減少することを報告した。本研究は、M.aviumに感染した気道上皮細胞の免疫反応を解析することでより有効な治療法の発見を目指すものである。
マウスのⅠ型肺胞上皮細胞にM. avium臨床分離株を感染させると、オートファゴソームマーカーであるLC3の発現が減少することが分かった。PCRアレイ解析では感染細胞のmTORとその上流因子であるSlc37a4シグナリングへの影響が示唆された。なお、NACを投与すると菌数の減少とともにいずれのオートファジーの誘導がみられた。Bafilomycinによるオートファジーの阻害はNACによる菌数抑制効果を阻害した。非結核性抗酸菌が宿主細胞のオートファジーに及ぼす影響についての報告は少なく、本検討ではM. aviumは感染気道上皮細胞のオートファジーを抑制して慢性感染に至る可能性と、NACの免疫補助剤としての可能性が示唆された。今後は、再現性実験を行うとともに、現在までに判明しているSlc37a4シグナリングへの影響の解析および、解析対象を気管・気管支上皮に広げ、NACに関わらず宿主細胞のオートファジーを促進する薬剤の使用を検討していく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今年度前半は、新型コロナウイルス感染症の流行のため必要物品の納入が遅れたり、新規試薬を用いた手技の不安定性などから予定通りの実験ができないことがあったが、徐々にその傾向は改善しつつある。
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| Strategy for Future Research Activity |
LC3の誘導についてウエスタンブロット法や免疫染色法を用いてSlc37a4シグナリングのより詳細な解析を実施する。
また、感染させる菌株により宿主細胞のオートファジーへの影響が異なるか、異なる場合には菌株の病原因子としてのM. avium菌株の全ゲノム解析を試みる。
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| Causes of Carryover |
必要な細胞や試薬の到着を待った分、研究計画が後方にずれ込んだため次年度使用額が生じた。次年度使用額と合わせて、実験に使用する培地や試薬、実験動物などを購入予定である。ゲノム解析費用にも充てる予定である。
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