2021 Fiscal Year Research-status Report
| Project/Area Number |
21K20912
|
|---|
| Research Institution | Juntendo University |
|---|
Principal Investigator |
安東 泰希 順天堂大学, 医学部, 助手 (10912644)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2021-08-30 – 2023-03-31
|
| Keywords | インフラマソーム / NLRP1 / 肝臓線維化 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
我々の研究グループは、肝硬変を伴う小児稀少疾患患者から同定されたNLRP1の点変異（NLRP1-P1214L）がNLRP1インフラマソームを異常活性化させることを見出した。本研究の目的は、NLRP1-P1214Lによる肝細胞のインフラマソーム活性化亢進が肝硬変を引き起こす病態機序を解明することである。異常高値を示した患者の血清IL-18が肝臓移植により大きく低下したこと、肝臓組織で肝細胞と一致してIL-18の高い発現が認められたこと、患者由来肝細胞株が恒常的にIL-18を大量に産生し、その細胞株でNLRP1を特異的にノックダウンするとIL-18の産生量が低下したことから、肝細胞におけるNLRP1-P1214Lによるインフラマソームの活性化亢進が肝臓繊維化を誘導する可能性を示した。さらに、P1214L点変異によりNLRP1と（NLRP1インフラマソームの活性化を抑制する）DPP9の結合が低下して、DPP9による抑制作用が解除されることを示し、NLRP1-P1214Lがインフラマソームを異常活性化させる分子機序を明らかにした。また、特異な病態形成におけるNLRP1-P1214Lの役割を明らかにするため、NLRP1-P1214Lのコンディショナルノックインマウスの解析を開始した。最初に、NLRP1-P1214Lが肝細胞特異的に発現するマウスの肝細胞でNLRP1-P1214Lが発現することを確認した。このマウスは、体重増加などの発育に異常を示さず、観察期間中の血清GOT・GPT値や血清IL-18・IL-1beta値は正常範囲以内であった。肝臓組織においても炎症細胞浸潤や肝臓繊維化などの異常は認められなかった。肝細胞にNLRP1-P1214Lが発現するだけでは、インフラマソームの活性化亢進による肝臓繊維化には至らない可能性が示された。現在、肝臓繊維化に至る分子機序を解析している。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
P1214L点変異によりNLRP1と（NLRP1インフラマソームの活性化を抑制する）DPP9の結合が低下することを示し、NLRP1-P1214Lがインフラマソームを異常活性化させる分子機序を明らかにした。また、遺伝子改変マウスを利用して、肝細胞にNLRP1-P1214Lが発現するだけでは肝臓繊維化に至らないことを示した。従って、本研究はおおむね順調に進展していると考えられる。今後、肝細胞におけるNLRP1-P1214Lの発現とともに、どのような環境因子が肝臓繊維化を強く誘導するかを明らかにする予定である。
|
| Strategy for Future Research Activity |
肝細胞から放出されるNLRP3インフラマソームの粒子が膠細胞に取り込まれて肝臓線維化を誘導する可能性が報告された。同様の機序で、肝細胞におけるNLRP1インフラマソームの粒子が膠細胞を含む他の細胞に作用するかを解析する。また、NLRP1-P1214Lが肝細胞特異的に発現するマウスに肝臓の炎症を惹起する分子を投与して、肝臓の線維化が強く誘導されるかを調べる。
|
| Causes of Carryover |
新型コロナ感染の拡大により、研究の制限される期間があった。また、年度内の実験に必要な物品の調達が遅延した。従って、予定していた実験（遺伝子改変マウスの解析など）に支障をきたした。次年度において、遺伝子改変マウスを使用する実験に必要な経費（マウス代など）や病態機序を解明するためのin vitro実験に必要な経費に研究費を使用する。
|
Research Products
(7 results)
-
[Journal Article] A Possible Association Between a Nucleotide-Binding Domain LRR-Containing Protein Family PYD-Containing Protein 1 Mutation and an Autoinflammatory Disease Involving Liver Cirrhosis.2021
Author(s)
Yasudo H, Ando T, Maehara A, Ando T, Izawa K, Tanabe A, Kaitani A, Nomura S, Seki M, Yoshida K, Oda H, Okamoto Y, Wang H, Kamei A, Kojima M, Kimura M, Uchida K, Nakano N, Kaneko J, Ebihara N, Hasegawa K, Shimizu T, Takita J, Ogawa H, Okumura K, Ogawa S, Tamura N, Kitaura J.
-
Journal Title
Hepatology
Volume: 74
Pages: 2296～2299
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
[Presentation] A point mutation within the function-to-find domain (FIIND) of human NLRP1 causes an autoinflammatory disease involving liver fibrosis and dyskeratosis.2021
Author(s)
Akie Maehara, Taiki Ando, Kumi Izawa, Tomoaki Ando, Ayako Kaitani, Anna Kamei, Hexing Wang, Koji Tokushige, Nobuhiro Nakano, Naoto Tamura, Ko Okumura, Jiro Kitaura
Organizer
第50回日本免疫学会学術集会
-
-
