2022 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidation of the pathogenic mechanism of autoimmune pituitary diseases
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21K20933
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
蟹江 慶太郎 京都大学, iPS細胞研究所, 研究員 (90905829)
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2021-08-30 – 2023-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 下垂体機能低下症 / 自己免疫性下垂体疾患 / 抗原特異的キラーT細胞 / 抗原特異的CTL |
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| Outline of Annual Research Achievements |
下垂体機能低下症をきたす自己免疫性下垂体疾患は、自己免疫機序が推定されているがその本態は明らかではない。自己免疫性下垂体疾患の一つである自己免疫性下垂体炎は、その発症に特異的なキラーT細胞の関与が示唆されているが、特異的抗原の同定が困難であり、患者固有のHLAを持つヒト下垂体を用いた疾患モデルが必要であることから解析が困難であった。自己免疫性下垂体炎の患者由来iPS細胞を利用した疾患モデルを作成し、細胞性免疫あるいは液性免疫の細胞傷害への関与を明らかにし、自己免疫性下垂体疾患の発症メカニズムを解明することを本研究の目的とした。本研究では、申請者らがこれまで病態を明らかにしてきた自己免疫性下垂体疾患である抗PIT-1下垂体炎のin vitro疾患モデルを樹立し、解析を行った。①患者iPS細胞から下垂体の作成、②患者由来PIT-1特異的キラーT細胞の単離及び、下垂体との共培養を用いたin vitro疾患モデル作成、③下垂体と患者血清、末梢血液単核球細胞 (PBMC)を用いた補体依存性細胞傷害（CDC）活性、抗体依存性細胞傷害（ADCC）活性の評価の3ステップで実施した。①PIT-1-GFP iPS細胞を作製し、これを下垂体細胞に分化誘導した。②患者PBMCより特性のサブセットを除去した細胞集団を用いて、特異的キラーT細胞の単離、クローン化に成功した。このキラーT細胞と患者由来下垂体細胞の共培養実験によりPIT-1陽性細胞特異的細胞傷害を再現した。また、この細胞傷害を抑制する薬剤スクリーニングにも成功した。③ADCC、CDC活性は本疾患の病態に関与していないことを本実験系において示した。
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