表皮細胞を標的とした強皮症に伴う難治性皮膚潰瘍の新規治療薬開発

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K20984
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 尾松 淳 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (70908334)
• Project Period (FY): 2021-08-30 – 2023-03-31
• Keywords: 全身性強皮症 / 表皮細胞 / DNAアプタマー

Outline of Annual Research Achievements

表皮細胞の増殖・抑制に関わる複数のシグナルの抑制・活性化を実現するために比較的安価であるDNAアプタマーの作成をSELEX法をもちいて検討した。 表皮細胞の増殖に関わるIL-17やEGF受容体などの各受容体に結合するDNAアプタマーの取得を網羅的に行った。合成一本鎖DNA核酸ライブラリーを基に核両端にプライマー配列を持つ40塩基のランダムDNAを化学合成し、各受容体細胞外ドメインの組み換えタンパク質と混合し、結合配列を単離してPCR増幅する一連のサイクルを行い配列解析を行い、結合する複数のDNAアプタマー配列の単離に成功した。次に上皮細胞特異的Fli1欠失マウスより採取した表皮細胞をもちいてIL-17A、EFGなどの結合活性を確認した。その結果、IL-17Aに対する有用なDNAアプタマーを同定した。また、現在IL-23などのDNAアプタマーも作成中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

表皮細胞の増殖・抑制に関わる複数のシグナルに対する網羅的なDNAアプタマーの作成をSELEX法で試み、IL-17AのDNAアプタマーに関する作成手法を確立した。また、別のサイトカインであるIL-23についても現在作成の目処が立ってきており、計画通りの進行速度で研究できている。

Strategy for Future Research Activity

確立したIL-17AのDNAアプタマーを用いてナノリポソームカプセル含有クリームによるdrug delivery systemの確立を試みる。また、IL-23のDNAアプタマーについてもin vitroでの検討を進めDDSへの応用も試みる。