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2010 Fiscal Year Annual Research Report

機能性ポリマーキャピラリーアレイ型1ステップマルチセンサー開発と創薬・診断展開

Research Project

Project/Area Number 22350038
Research InstitutionOsaka Prefecture University

Principal Investigator

久本 秀明  大阪府立大学, 工学研究科, 教授 (00286642)

Keywordsイムノアッセイ / 阻害剤アッセイ / PDMS / キャピラリー / センサー
Research Abstract

ここでは凹凸型PDMSスティックを作製・表面修飾ののち、それらを組み合わせることで競合型イムノアッセイ・酵素阻害剤アッセイ用PDMSキャピラリーを作製した。
イムノアッセイでは凸型PDMSにBSA・グルタルアルデヒドを介した抗原化学結合薄膜(不溶性)、凹型PDMSにペルオキシダーゼ(POD)標識抗体含有直鎖ポリエチレングリコール物理吸着薄膜(可溶性)を、酵素阻害剤アッセイでは凸型PDMSにプロテアーゼ含有ポリカチオン・ポリアニオン層状薄膜(不溶性)、凹型PDMSに蛍光基質含有直鎖ポリエチレングリコール物理吸着薄膜(可溶性)を固定し、それぞれののパーツを組み合わせ、PDMSキャピラリーを作製した。作製したPDMSキャピラリーに試料溶液を毛細管力導入し、蛍光顕微鏡を用いて発蛍光信号をCCD画像検出した。その結果、イムノアッセイでは1~10μg/mlの範囲で蛍光強度差が現れ、今回提案した競合型イムノアッセイの1ステップ化が原理的に可能であることがわかった。しかしながら、検出濃度範囲はまだ改善の余地があるため、今後、試薬濃度の最適化等を進めて行きたい。一方、酵素阻害剤アッセイでは代表的なプロテアーゼであるトリプシンを用い、その阻害剤アッセイを試みた結果、試料導入のみの1ステップで蛍光信号が得られ、簡便な1ステップ阻害剤アッセイが可能であることがわかった。また、阻害度を表すIC50値を文献値と比較したところ、ほぼ同じ値であったことから、本法で求められる阻害度は有意なものであることも明らかとなった。ここでは試料導入の改善も検討した。PDMSは疎水性が高いために毛細管現象による試料導入の再現性が悪い欠点があったが、PDMSの一部に親水基含有PDMSを混入させることで簡便かつ容易に試料導入の問題を解決できることを明らかにした。

  • Research Products

    (9 results)

All 2010 Other

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (5 results) Book (2 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] SINGLE-STEP AND MULTIPLE BIOASSAY BASED ON COMBI NABLE PDMS CAPILLARY (CPC) SENSOR ARRAY2010

    • Author(s)
      Yosuke Uchiyama, et al.
    • Journal Title

      Proc.Micro-TAS

      Pages: 563-565

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 機能性PDMS組み合わせ型キャピラリー(9)金属薄膜コーティングによる蛍光検出バイオアッセイの高感度化2010

    • Author(s)
      藤井裕二, ら
    • Organizer
      第22回化学とマイクロ・ナノシステム研究会
    • Place of Presentation
      名古屋(愛知)
    • Year and Date
      2010-11-17
  • [Presentation] 機能性PDMS組み合せ型1ステップキャピラリーセンサー(10)PDMSの化学修飾が阻害剤アッセイに及ぼす影響とマルチアッセイの検討2010

    • Author(s)
      内山陽介, ら
    • Organizer
      第22回化学とマイクロ・ナノシステム研究会
    • Place of Presentation
      名古屋(愛知)
    • Year and Date
      2010-11-17
  • [Presentation] 機能性PDMS組合せ型1ステップキャピラリーセンサー(8)PDMSの改質に基づく試料導入・定量性の基礎検討2010

    • Author(s)
      内山陽介, ら
    • Organizer
      日本分析化学会第59年会
    • Place of Presentation
      仙台(宮城)
    • Year and Date
      2010-09-15
  • [Presentation] 機能性PDMS組合せ型1ステップキャピラリーセンサー(7)流路サイズ及び改質PDMSの検討2010

    • Author(s)
      内山陽介, ら
    • Organizer
      第21回化学とマイクロ・ナノシステム研究会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2010-06-11
  • [Presentation] 機能性PDMS組合せ型1ステップキャピラリーセンサー(6)PDMSの改質による修飾均一性・試料導入挙動の改善とマルチ化の試み2010

    • Author(s)
      内山陽介, ら
    • Organizer
      第71回分析化学討論会
    • Place of Presentation
      松江(島根)
    • Year and Date
      2010-05-15
  • [Book] 「バイオチップ実用化ハンドブック」、第4章「国内外の動向」第5節「技術展望~バイオチップの将来技術~」2010

    • Author(s)
      久本秀明
    • Total Pages
      664
    • Publisher
      1ステップ化学センシングキャピラリーチップ
  • [Book] Environmentally Harmonious Chemistry for the 21st Century, Chapter I2010

    • Author(s)
      Toshio Yao, Hideaki Hisamoto
    • Total Pages
      220
    • Publisher
      Bioanalytical systems with in vivo biosensors and microfluidic devices
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.chem.osakafu-u.ac.jp/ohka/ohka1/hisamoto/hisamoto-j.html

URL: 

Published: 2012-07-19  

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