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2012 Fiscal Year Annual Research Report

酢酸菌「酸化発酵」の分子基盤解析とそれに基づく「酸化発酵」能の開発

Research Project

Project/Area Number 22380054
Research InstitutionYamaguchi University

Principal Investigator

松下 一信  山口大学, 農学部, 教授 (50107736)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 藥師 寿治  山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30324388)
Project Period (FY) 2010-04-01 – 2013-03-31
Keywords酸化発酵 / 酢酸菌 / キノプロテイン / フラボプロテイン / 末端オキシダーゼ
Research Abstract

グリセロールからのジヒドロキシアセトン(DHA)発酵に関与するキノプロテイン・グリセロール脱水素酵素(GLDH)は,ソルボース発酵などその他多くの酸化発酵で機能している。このGLDHを中心にした酸化発酵系の呼吸鎖,酸化生成物の資化に関わる膜輸送・資化酵素系の解析を含めて,「酸化発酵」分子機構の全般的な解明を目指している。以下,本年度の成果をまとめる。①Gluconobacterの多くは2つのGLDHパラログをもつことが分かってきた。G. thailandicus IFO3255の1つのパラログGLDH (3255_0026)の遺伝子破壊は,GLDHの関与するほぼ全ての酸化活性を消失させたため,別のパラログ(3255_0236)は別の機能をもつ新規酵素であると推定された。②G. oxydans 621Hと違いIFO3255はDHA資化能を有している。今回,IFO3255ゲノム中に,621Hに存在しないDHA kinase パラログ(3255_2003)が見つかり,この酵素がDHA資化に関与していると推定された。③フラボプロテイン・ソルビトール脱水素酵素遺伝子(sldSLC)の上流に存在する遺伝子群(sldR, xdhA, perA)の解析によって,そのXdhA(NAD依存脱水素酵素)とPerA(トランスポーター)がソルボースの取込み資化に関与していることが示唆された。④ フラボプロテイン・フルクトース脱水素酵素の遺伝子工学的解析によって,他のフラボプロテイン同様,本酵素もそのチトクロム・サブユニットを介してユビキノン還元を行っていることが示唆された。⑤グリセロールからのDHA生成はキノプロテインADHによるグリセリン酸生成反応と競合している。今回,培地中に含まれるメタノールがADH活性を阻害することで,グリセリン酸生成を抑制し,逆にDHA生成を増進することが明らかとなった。

Current Status of Research Progress
Reason

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (22 results)

All 2013 2012 Other

All Journal Article (7 results) (of which Peer Reviewed: 7 results) Presentation (13 results) (of which Invited: 5 results) Book (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Heterologous overexpression and characterization of a flavoprotein-cytochrome c complex fructose dehydrogenase of Gluconobacter japonicus NBRC3260.2013

    • Author(s)
      Kawai S, Goda-Tsutsumi M, Yakushi T, Kano K, Matsushita K.
    • Journal Title

      Appl Environ Microbiol.

      Volume: 79 Pages: 1654-1660

    • DOI

      doi: 10.1128/AEM.03152-12.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Adaptive mutation of Acetobacter pasteurianus SKU1108 enhances acetic acid fermentation ability at high temperature.2013

    • Author(s)
      Matsutani M, Nishikura M, Saichana N, Hatano T, Masud-Tippayasak U, Theergool G, Yakushi T, Matsushita K.
    • Journal Title

      J Biotechnol.

      Volume: 165 Pages: 109-119

    • DOI

      doi: 10.1016/j.jbiotec.2013.03.006.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Change in product selectivity during the production of glyceric acid from glycerol by Gluconobacter strains in the presence of methanol.2013

    • Author(s)
      Sato S, Morita N, Kitamoto D, Yakushi T, Matsushita K, Habe H.
    • Journal Title

      AMB Express.

      Volume: 3 Pages: 20

    • DOI

      doi: 10.1186/2191-0855-3-20.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Draft Genome Sequence of Dihydroxyacetone-Producing Gluconobacter thailandicus Strain NBRC 3255.2013

    • Author(s)
      Matsutani M, Kawajiri E, Yakushi T, Adachi O, Matsushita K.
    • Journal Title

      Genome Announc.

      Volume: 1 Pages: e00118-13

    • DOI

      doi:pii: e00118-13. 10.1128/genomeA.00118-13.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cyanide-insensitive Quinol Oxidase (CIO) from Gluconobacter oxydans is a unique terminal oxidase subfamily of cytochrome bd.2013

    • Author(s)
      Hiroshi Miura, Tatsushi Mogi, Yoshitaka Ano, Catharina T. Migita, Minenosuke Matsutani, Toshiharu Yakushi, Kiyoshi Kita, Kazunobu Matsushita
    • Journal Title

      J Biochem.

      Volume: 153 Pages: in press

    • DOI

      doi: 10.1093/jb/mvt019

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Characterization of Genes Involved in (D)-Sorbitol Oxidation in Thermotolerant Gluconobacter frateurii.2012

    • Author(s)
      Soemphol W, Saichana N, Yakushi T, Adachi O, Matsushita K, Toyama H
    • Journal Title

      Biosci Biotechnol Biochem

      Volume: 76(8) Pages: 1497-1505

    • DOI

      doi.org/10.1271/bbb.120227

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] High-temperature sorbose fermentation with thermotolerant Gluconobacter frateurii CHM43 and its mutant strain adapted to higher temperature.2012

    • Author(s)
      Hattori H, Yakushi T, Matsutani M, Moonmangmee D, Toyama H, Adachi O, Matsushita K.
    • Journal Title

      Appl Microbiol Biotechnol.

      Volume: 95 Pages: 1531-1540

    • DOI

      doi: 10.1007/s00253-012-4005-4.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 酢酸菌Acetobacter pasteurianus由来のシトクロムbdとシアン非感受性キノールオキシダーゼ(CIO)の精製2012

    • Author(s)
      阿南康幸、三浦弘嗣、薬師寿治、松下一信
    • Organizer
      日本生体エネルギー研究会第38回討論会
    • Place of Presentation
      岡山大学(岡山市)
    • Year and Date
      20121222-20121224
  • [Presentation] 酢酸菌Acetobacter pasteurianus IFO 3283株の適応育種とその比較ゲノム解析による「耐熱化」遺伝子の解析2012

    • Author(s)
      松本 奈実, 松谷 峰之介, 東 慶直, 薬師 寿治, 松下 一信
    • Organizer
      第35回(2012年)日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場(福岡市)
    • Year and Date
      20121211-20121214
  • [Presentation] Core University Program to Asian Core Program: Thermotolerant microorganisms to high-temperature fermentation2012

    • Author(s)
      Kazunobu Matsushita
    • Organizer
      JSPS-NRCT Asian Core Program Final Seminar
    • Place of Presentation
      海峡メッセ (Shimonoseki), Japan
    • Year and Date
      20121118-20121120
    • Invited
  • [Presentation] High-temperature Sorbose Fermentation with Thermo-adapted Gluconobacter frateurii.2012

    • Author(s)
      Matsushita Kazunobu, Hattori Hiromi, Matsutani Minenosuke, and Yakushi Toshiharu
    • Organizer
      13th Swiss Japanese Conference on Biotechnology and Bioprocess Engineering
    • Place of Presentation
      Walzenhausen, Swizerland
    • Year and Date
      20121104-20121106
    • Invited
  • [Presentation] 酢酸菌研究から高温発酵系開発へ ―伝統・継承・発展- 地方大学に求められるもの―2012

    • Author(s)
      松下一信
    • Organizer
      農芸化学会中四国支部大会第34回講演会
    • Place of Presentation
      山口大学工学部(宇部市)
    • Year and Date
      20120921-20120922
    • Invited
  • [Presentation] 酢酸菌Acetobacter pasteurianusIFO3283株の高温適応育種2012

    • Author(s)
      松本奈美,松谷峰之介,薬師寿治,松下一信
    • Organizer
      農芸化学会中四国支部大会第34回講演会
    • Place of Presentation
      山口大学工学部(宇部市)
    • Year and Date
      20120921-20120922
  • [Presentation] 酢酸菌Acetobacter pasteurianus SKU1108のアルコール脱水素酵素の性質2012

    • Author(s)
      松本翔児,薬師寿治,松下一信
    • Organizer
      農芸化学会中四国支部大会第34回講演会
    • Place of Presentation
      山口大学工学部(宇部市)
    • Year and Date
      20120921-20120922
  • [Presentation] Adaptive Evolution and Adaptive Breeding of Acetic Acid Bacteria, and its Future Prospect for AAB Research and Development2012

    • Author(s)
      Kazunobu Matsushita
    • Organizer
      3rd International Conference on Acetic Acid Bacteria
    • Place of Presentation
      Cordoba, Spain
    • Year and Date
      20120417-20120420
    • Invited
  • [Presentation] Diversity of the Respiratory Chain of AAB, Especially Acetobacter pasteurianus, Gluconacetobacter diazotrophicus and Gluconobacter oxydans2012

    • Author(s)
      Hiroshi Miura, Shuhei Nishiyama, Misato Arimitsu, Yasuyuki Anami, Minenosuke Matsutani, Toshiharu Yakushi, Kazunobu Matsushita
    • Organizer
      3rd International Conference on Acetic Acid Bacteri
    • Place of Presentation
      Cordoba, Spain
    • Year and Date
      20120417-20120420
  • [Presentation] 耐熱性および耐熱化発酵微生物による高温発酵系の開発

    • Author(s)
      松下一信
    • Organizer
      第24回中四国伝熱セミナー・広島
    • Place of Presentation
      ビュー・ポートくれ(呉市)
    • Invited
  • [Presentation] 膜結合型アルコール脱水素酵素の結晶化と変異体作製

    • Author(s)
      川畑成由, 赤堀亮, 小佐田健吾, 足立収生, 薬師寿治, 松下一信, 後藤勝
    • Organizer
      第4回酢酸菌研究会
    • Place of Presentation
      山口大学大学会館(山口市)
  • [Presentation] Gluconacetobacter xylinus IFO3288の適応変異による耐熱化株の取得

    • Author(s)
      伊藤光平,薬師寿治,松下一信
    • Organizer
      第4回酢酸菌研究会
    • Place of Presentation
      山口大学大学会館(山口市)
  • [Presentation] Gluconobacter属酢酸菌のジヒドロキシアセトン代謝関連酵素に関する研究

    • Author(s)
      河尻恵理佳,松谷峰之介,小東 陽,後藤 勝,薬師寿治,足立収生,松下一信
    • Organizer
      第4回酢酸菌研究会
    • Place of Presentation
      山口大学大学会館(山口市)
  • [Book] 食物と健康の科学シリーズ「酢の機能と科学」 4.2. 生理・生化学2012

    • Author(s)
      松下一信・薬師寿治
    • Total Pages
      136-150
    • Publisher
      朝倉書店
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 酢酸生産能が向上した酢酸菌の育種方法2012

    • Inventor(s)
      松下一信, その他
    • Industrial Property Rights Holder
      山口大学
    • Industrial Property Number
      特願2012-210068
    • Filing Date
      2012-09-24

URL: 

Published: 2014-07-24  

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