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2011 Fiscal Year Annual Research Report

魚類における補体活性化制御因子を活用した免疫応答の最適化

Research Project

Project/Area Number 22380111
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

中尾 実樹  九州大学, 大学院・農学研究院, 教授 (50212080)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 杣本 智軌  九州大学, 大学院・農学研究院, 准教授 (40403993)
Keywords補体 / 制御因子 / コイ / ギンブナ / 免疫 / 相互作用 / モノクローナル抗体 / 組換えタンパク質
Research Abstract

本研究は、自然免疫の第一線で働く補体系活性化の促進あるいは抑制による獲得免疫応答の制御機構を解明し、優れた生体防御能と免疫記憶を魚類に賦与できるように、免疫応答の補体活性化制御による最適化を目指した。本年度は、これまでに単離・同定あるいはクローニングしたコイとギンブナ補体成分C3および補体制御因子Tecremについて、それらの相互作用を解析することを目的とした。まず、TecremのC3に対する作用を、組換えTecrem発現CHO細胞に対するコイC3の沈着を、コイC3に対するモノクローナル抗体を用いたフローサイトメトリーによって解析した。その結果、Tecrem発現細胞は、非発現細胞と比べて有為に、コイC3の沈着量が低いことが判明した。このC3沈着阻害作用は、先の実験で認めたTecrem発現細胞の補体による細胞障害反応に対する高い抵抗性を説明できるメカニズムとして注目される。さらにTecremの機能を解析するために、本年はコイTecremのSCR1~4ドメインから構成される可溶性組換えタンパク質の作出と、Tecremに対するモノクローナル抗体(MAb)の樹立を進めた。可溶性Tecremについてはバキュロウイルス・昆虫細胞による発現系の構築に成功し、現在はその精製にこぎつけている。一方、抗Tecrem MAbについては、Tecrem発現CHO細胞に強い反応性を示す抗体のスクリーニングを終えたところである。また、これらのMAbにはギンブナTecremへの交差反応も期待でき、コイとギンブナにおけるTecrem発現リンパ球サブセットの同定およびリンパ球の機能解析に必要なツールとしてMAbを活用する準備が整った。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

ギンブナでの解析はコイと比較して進捗が遅いが、組換えTecremの発現やモノクローナル抗体の樹立が進んたので、今年度の成果としては概ね順調であり、来年度の研究に必要なツールが揃ったと評価できる。

Strategy for Future Research Activity

可溶性の組換えTecremタンパク質および抗コイTecremモノクローナル抗体をツールとして最大限に活用し、Tecremの機能を、タンパク質・細胞レベルで解析していく。特に、混合リンパ球反応などの獲得免疫応答におけるTecremの応答調節作用を詳細に解析できると期待される。

  • Research Products

    (10 results)

All 2012 2011

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (6 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] The binding spectra of carp C3 isotypes against natural targets independent of the binding specificity of their thioester2012

    • Author(s)
      Ichiki S, Kato-Unoki Y, Somamoto T, Nakao M
    • Journal Title

      Developmental & Comparative Immunology

      Volume: (In press)(未発行)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The complement system in teleost fish : progress of post-homolog-hunting researches2011

    • Author(s)
      Nakao M, Tsujikura M, Ichiki S, Vo TK, Somamoto T
    • Journal Title

      Developmental & Comparative Immunology

      Volume: 35 Pages: 1296-1308

    • DOI

      10.1016/j.dci.2011.03.003

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Molecular characterization of MHC class I and beta-2 microglobulin in a clonal strain of ginbuna crucian carp, Carassius auratus langsdorfii2011

    • Author(s)
      Urabe S, Somamoto T, Sameshima S, Unoki-Kato Y, Nakanishi T, Nakao M
    • Journal Title

      Fish & Shellfish Immunology

      Volume: 31 Pages: 469-474

    • DOI

      10.1016/j.fsi.2011.06.004

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] rag-1遺伝子欠損によるゼブラフィッシュの獲得免疫不全の検証と遺伝子の発現変動2011

    • Author(s)
      徳永弓枝・白水正道・安住薫・吉浦康寿・乙竹充・杣本智軌・中尾実樹
    • Organizer
      平成23年度日本水産学会秋季大会
    • Place of Presentation
      長崎大学水産学部(長崎)
    • Year and Date
      2011-09-30
  • [Presentation] 補体の内外に見るホメオスタシス2011

    • Author(s)
      中尾実樹
    • Organizer
      日本動物学会第82回大会シンポジウム
    • Place of Presentation
      大雪ホール(旭川)(招待講演)
    • Year and Date
      2011-09-21
  • [Presentation] コイ補体成分C4アイソタイプ(C4-1,C4-2)の結合特異性の解析2011

    • Author(s)
      山本暁・一木智子・杣本智軌・中尾実樹
    • Organizer
      第48回補体シンポジウム
    • Place of Presentation
      名古屋市立大学(名古屋)
    • Year and Date
      2011-09-02
  • [Presentation] 魚類における補体活性化制御因子の多様性2011

    • Author(s)
      辻倉正和・杣本智軌・鵜本陽子・中尾実樹
    • Organizer
      第23回日本比較免疫学会学術集会
    • Place of Presentation
      JAMSTEC(横浜)
    • Year and Date
      2011-08-22
  • [Presentation] Structural and functional diversity of the complement system, aninnate immune factor, in fish2011

    • Author(s)
      Nakao M, Tsujikura M, Ichiki S, Vo TK, Somamoto T
    • Organizer
      International Congress of Comparative Physiology and Biochemistry 2011
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場(名古屋)(招待講演)
    • Year and Date
      2011-06-03
  • [Presentation] Complement system in teleost fish : Isotypic diversity in pathogenrecognition, activation cascade, and ontogeny2011

    • Author(s)
      Nakao M, Ichiki S, Tsujikura M, Vo TK, Somamoto T
    • Organizer
      Comparative Immnology and Pathology Workshop
    • Place of Presentation
      University of Alberta (Canada)(招待講演)
    • Year and Date
      2011-05-24
  • [Book] 補体への招待(2-5-2補体系の進化:脊椎動物)2011

    • Author(s)
      中尾実樹・杣本智軌
    • Total Pages
      231
    • Publisher
      メジカルビュー社

URL: 

Published: 2013-06-26  

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