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2011 Fiscal Year Annual Research Report

卵胞選抜の分子機構に基づく家畜卵子の品質判定法の創出

Research Project

Project/Area Number 22380148
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

眞鍋 昇  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80243070)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 宮野 隆  神戸大学, 農学研究科, 教授 (80200195)
奥田 潔  岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 教授 (40177168)
Keywords卵子品質 / 卵胞閉鎖 / 細胞死阻害因子 / 顆粒層細胞 / アポトーシス / 哺乳類 / 卵巣 / 発現制御
Research Abstract

20世紀末から今世紀にかけて様々な家畜の発生工学・遺伝子工学技術が編み出され、体細胞核クローン動物や遺伝子改変動物などが作出されてきている。しかしながらこれらの成功率は未だに低い。その原因のひとつとして、供する卵子(卵母細胞)の品質が低いことが挙げられる。しかし卵子品質評価を分子レベルで評価しようとした研究は未だに皆無である。哺乳類では、胎児期に減数分裂の途中、複糸期の状態で休眠している卵子が、性成熟後、性周期毎に分裂を再開して発育・成熟する。この過程で99%以上が選択的に死滅し、不都合な卵子が取除かれる機構が備えられている。本研究では、これまで申請者らが継続してきた選択的卵子死滅の分子制御機構の解明研究の成果を活用し、死滅すべき卵子を判定し、排卵にいたる高品質卵子のみを動物発生工学や生殖医療に供し得る技術システムを創出しようとしている。今年度は、前年度に続いて顆粒層細胞におけるアポトーシス・シグナルの阻害因子の発現を指標にすれば卵子の健常度を見極めることができるか否か検討をすすめた。特に、個々の卵胞を分別して卵子の正常性、体外授精後の初期胚の発生の正常性、卵胞液の性状およびこれらと同じ卵胞内の顆粒層細胞における阻害因子の発現レベルとの関連性の精査した結果、高い相関性があることが確認できた。併せて、阻害因子発現を調節している因子の探索とその分子制御機構を調べ、インターロイキン6が重要な司令塔的な役割を果たしていることを見出した。同時に簡便かつ高感度な判定システムの開発と凍結保存・異種移植・遺伝子導入・卵子の体外成熟と体外受精および初期胚の体外培養からなるシステムの統合を進めて、本研究で見出した知見を実際の家畜増産に活用できる方策の具現化をすすめることもできた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

平成23年3月11日に研究室所在地の笠間市では震度6強を5分間以上の震災を経験し、これによって多くの研究設備・機器が破損したり修理を要する状況になったために研究の進展は遅れたが、卵胞の選択的死滅を調節しているアポトーシス阻害因子の発現推移を詳細にしらべ、それの制御においてインターロイキン6が重要な司令塔的な役割を果たしていることを見出し、論文投稿の準備を進めることができた。

Strategy for Future Research Activity

震災に起因する研究進展の遅滞を除けば概ね順調に進捗している。また破損したり修理を要する研究設備・機器の新調や修繕を終えることができたので、研究計画調書に記載した年次計画に従って粛々と遂行して、当初の目標を達成する。

  • Research Products

    (54 results)

All 2012 2011 Other

All Journal Article (27 results) (of which Peer Reviewed: 25 results) Presentation (21 results) Book (5 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Follicular growth and atresia in mammlian ovaries : Regulation by survival and death of granulosa cells2012

    • Author(s)
      Fuko Matsuda, Naoko Inoue, Noboru Manabe, Satoshi Ohkura
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 58 Pages: 44-50

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Follicular turnover and hormonal association in postpartum goats during early and late lactation2012

    • Author(s)
      Mohamed M M Kandiel, Gen Watanabe, Mahmoud E A Abou-El-Roos, Alaa E Abdel-Ghaffar, Gamal A Sosa, Abd El-Salam I El-Azab, Kentaro Nagaoka, Jun-You Li, Noboru Manabe, Kazuyoshi Taya
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 58 Pages: 61-68

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effect of RNA interference of Bid and Bax mRNAs on apoptosis in granulosa cell-derived KGN cells2012

    • Author(s)
      Takafumi Sai, Fuko Matsuda, Yasufumi Goto, Akihisa Maeda, Miki Sugimoto, Hong-Mei Gao, Abul Khair Mohammad Ahan Kabir, Jun-You Li Noboru Manabe
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 58 Pages: 112-116

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 福島第一原子力発電所事故後の茨城県産牧草を給与した牛の乳における放射性核種物質濃度2012

    • Author(s)
      橋本健, 田野井慶太朗, 桜井健太, 飯本武志, 野川憲夫, 桧垣正吾, 小坂尚樹, 高橋友継, 榎本百合子, 小野山一郎, 李俊佑, 眞鍋昇, 中西友子
    • Journal Title

      Radioisotopes

      Volume: 60 Pages: 335-338

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 抗アポトーシス因子cFLIPによる哺乳類の卵胞選抜制御機構2012

    • Author(s)
      松田二子, 眞鍋昇
    • Journal Title

      比較内分泌学

      Volume: 38 Pages: 27-32

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] アミノ酸カクテル強化哺乳による牛のエピジェネティック体質改善2012

    • Author(s)
      眞鍋昇, 李俊佑
    • Journal Title

      畜産技術

      Volume: 56 Pages: 16-19

  • [Journal Article] 飼料中の放射性物質の牛乳への移行と今後の対策2012

    • Author(s)
      眞鍋昇, 李俊佑, 高橋友継, 遠藤麻衣子, 榎本百合子, 田野井慶太朗, 中西友子
    • Journal Title

      デイリージャパン

      Volume: 12 Pages: 25-27

  • [Journal Article] Effects of interleukin-8 on estradiol and progesterone production by bovine granulosa cells from large follicles and progesterone production by luteinizing granulosa cells in culture2012

    • Author(s)
      Shimizu T, Kaji A, Murayama C, Magata F, Shirasuna K, Wakamiya K, Okuda K, Miyamoto A
    • Journal Title

      Cytokine

      Volume: 57 Pages: 175-181

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Expression and function of apoptosis initiator FOXO3 in granulosa cells during follicular atresia in pig ovaries2011

    • Author(s)
      Fuko Matsuda, Naoko Inoue, Akihisa Maeda, Yuan Cheng, Takafumi Sai, Hiroshi Gonda, Yasufumi Goto, Kazuhiro Sakamaki, Noboru Manabe
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 57 Pages: 151-158

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Feasibility of vitrifucation for represervation of frozen thawed bovine embryos after preimplantation genetic diagnosis2011

    • Author(s)
      Toshikiyo Takahashi, Hiroshi Nishinomiya, Ryu Itoh, Noboru Manabe
    • Journal Title

      Tohoku Journal of Animal Science

      Volume: 60 Pages: 92-98

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The role of cell-death ligand-receptor system of granulosa cells in selective follicular atresia in porcine ovary2011

    • Author(s)
      Naoko Inoue, Fuko Matsuda, Yasufumi Goto, Noboru Manabe
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 57 Pages: 169-175

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effects of estrogen on growth hormone pulsatility in peripheral blood and neuropeptide profiles in the cerebrospinal fluid of goats2011

    • Author(s)
      Tomohiro Yonezawa, Kazutaka Mogi, Jun You Li, Ryuji Sako, Noboru Manabe, Keitaro Yamanouchi, Masugi Nishihara
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 57 Pages: 280-287

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Rescue of vitrified fully grown and growing porcine oocytes by germinal vesicle transfer2011

    • Author(s)
      Shoma Nakagawa, Naoki Maedomari, Kazuhiro Kikuchi, Takashi Nagai, Takashi Miyano, Josef Fulka Jr, Noboru Manabe
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 57 Pages: 335-341

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Bid and Bax are involved in granulosa cell apoptosis during follicular atresia in porcine ovaries2011

    • Author(s)
      Takafumi Sai, Yasufumi Goto, Ryousuke Yoshioka, Akihisa Maeda, Fuko Matsuda, Miki Sugimoto, Kannika Wongpanit, Hua-Zi Jin, Jun-You Li, Noboru Manabe
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 57 Pages: 421-427

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Improvement of porcine oocytes with low developmental ability after fusion of cytoplasmic fragments prepared by serial centrifugation2011

    • Author(s)
      Nguyen Viet Linh, Kazuhiro Kikuchi, Michiko Nakai, Junko Noguchi, Hiroyuki Kaneko, Thanh Quang Dang-Nguyen, Naoki Maedomari, Bui Xuan Nguyen, Takashi Nagai, Noboru Manabe
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 57 Pages: 620-626

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Native pig (Moo Lat) breeds in Lao2011

    • Author(s)
      Soukanh Keonouchanh, Istvan Egerszegi, Jozsef Ratky, Bouahom Bounthong, Noboru Manabe, Klaus-Peter Brussow
    • Journal Title

      Archiv Tierzucht

      Volume: 54 Pages: 600-606

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] p27(Kip1) negatively regulates the activation of murine primordial oocytes2011

    • Author(s)
      Hirashima Y, Moniruzzaman M, Miyano T
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 57 Pages: 217-222

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] FOXO3 knockdown accelerates development of bovine primordial follicles2011

    • Author(s)
      Bao RM, Hayakawa K, Moniruzzaman M, Taketsuru H, Miyano T
    • Journal Title

      The Journal of Reproduction and Development

      Volume: 57 Pages: 465-480

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Nucleoli from growing oocytes inhibit the maturation of enucleolated, full-grown oocytes in the pig2011

    • Author(s)
      Kyogoku H, Ogushi S, Miyano T, Fulka J Jr
    • Journal Title

      Molecular Reproduction and Development

      Volume: 78 Pages: 426-435

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effect of H89 on the meiotic resumption of pig oocytes2011

    • Author(s)
      Cayo-Colca IS, Harayama H, Miyano T
    • Journal Title

      Reprod Med Biol

      Volume: 10 Pages: 89-96

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A combination of FSH and dibutyryl cyclic AMP promote growth and acquisition of meiotic competence of oocytes from early porcine antral follicle2011

    • Author(s)
      Cayo-Colca IS, Yamagami Y, Phan T-C, Miyano T
    • Journal Title

      Theriogenology

      Volume: 75 Pages: 1602-1612

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effect of KIT ligand on the viability of porcine primordial follicles in vitro2011

    • Author(s)
      Magamage MPS, Moniruzzaman M, Miyano T
    • Journal Title

      J Mamm Ova Res

      Volume: 28 Pages: 61-67

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Testosterone induces activation of porcine primordial follicles in vitro2011

    • Author(s)
      Magamage MPS, Zengyo M, Moniruzzaman M, Miyano T
    • Journal Title

      Reprod Med Biol

      Volume: 10 Pages: 21-23

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Tumor necrosis factor-α inhibits the stimulatory effect of luteinizing hormone and prostaglandin E2 on progesterone secretion by the bovine corpus luteum2011

    • Author(s)
      Szostek AZ, Lukasik L, Majewska M, Bah MM, Znaniecki R, Okuda K, Skarzynski DJ
    • Journal Title

      Domest Anim Endocrinol

      Volume: 41 Pages: 183-191

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Ovarian steroids modulate tumor necrosis factor-α and nitric oxide-regulated prostaglandin secretion by cultured bovine oviductal epithelial cells2011

    • Author(s)
      Szostek AZ, Siemieniuch MJ, Deptula K, Woclawek-Potocka I, Majewska M, Okuda K, Skarzynski DJ
    • Journal Title

      Domest Anim Endocrinol

      Volume: 41 Pages: 14-23

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Expressions of apoptosis-regulating factors in bovine retained placenta2011

    • Author(s)
      Kamemori Y, Wakamiya K, Nishimura N, Hosaka Y, Ohtani S, Okuda K
    • Journal Title

      Placenta

      Volume: 32 Pages: 20-26

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Possible involvement of oxytocin and its receptor in the local regulation of prostaglandin secretion in the cat endometrium2011

    • Author(s)
      Siemieniuch MJ, Mlynarczuk JJ, Okuda K, Skarzynski DJ
    • Journal Title

      Anim Reprod Sci

      Volume: 123 Pages: 89-97

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 好気性超高温発酵(最高117℃)産物の実践的な施肥利用での特徴2012

    • Author(s)
      高橋友継・入江猛・朴春香・李俊佑・大島泰郎・山村正一・眞鍋昇
    • Organizer
      第115回日本畜産学会
    • Place of Presentation
      名古屋(名古屋大学)
    • Year and Date
      2012-03-30
  • [Presentation] ブタ顆粒層細胞のBidとBax発現を阻害するとアポトーシス率が低下する2012

    • Author(s)
      眞鍋昇・才貴史・松田二子・小野山一郎・東福望・後藤康文・A.K.M.A.KABIR・高紅梅・李俊佑
    • Organizer
      第153回日本獣医学会
    • Place of Presentation
      大宮(感染症研究所)
    • Year and Date
      2012-03-28
  • [Presentation] 福島第一原子力発電所事故が家畜と畜産物におよぼす影響の実証的調査研究2012

    • Author(s)
      眞鍋昇
    • Organizer
      第153回日本獣医学会
    • Place of Presentation
      大宮(感染症研究所)
    • Year and Date
      2012-03-28
  • [Presentation] 放射性物質の乳製品への影響:乳牛における放射性セシウム動態を中心2012

    • Author(s)
      眞鍋昇
    • Organizer
      日本こども学会
    • Place of Presentation
      新宿(ベネッセ・コーポレーション)(招待講演)
    • Year and Date
      2012-03-17
  • [Presentation] Roles of decoy receptor 3 in physiological programmed cell death in ovarian follicular granulosa cells2011

    • Author(s)
      Noboru Manabe, Miki Sugimoto, Nozomu Toufuku, Hong-Mei Gao, A.K.M.A.Kabir, Yasufumi Goto, Ichiro Onoyama, Jun-You Li
    • Organizer
      The 26th International Forum of Jacques Cartier
    • Place of Presentation
      Paris, France(招待講演)
    • Year and Date
      2011-11-23
  • [Presentation] High expression of Bid, which is a key molecule controlling the selection of oocyte and follicle and is involved in granulosa cell apoptosis, is characteristics in Mangalica ovaries2011

    • Author(s)
      Noboru Manabe, Jozsef Ratky, Keiichi Sezaki, Yasufumi Goto, Ichiro Onoyama, Jun-You Li
    • Organizer
      Fatty Pig-Science and utilization International Conference
    • Place of Presentation
      Budapest, Hungary(招待講演)
    • Year and Date
      2011-11-17
  • [Presentation] Bid and Bax are involved in follicular granulosa cell apoptosis and suppression of their expression by small interfering RNA decreases in apoptotic rate in saws2011

    • Author(s)
      Noboru Manabe, Takafumi Sai, Fuko Matsuda, Naoko Inoue, Yasufumi Goto, Ichiro Onoyama, Jun-You Li
    • Organizer
      The 2nd World Congress on Reproductive Biology
    • Place of Presentation
      Cairns, Australia(招待講演)
    • Year and Date
      2011-10-10
  • [Presentation] Fertilization of porcine oocytes reconstructed by a serial centrifugation and fusion 'centri-fusion' method2011

    • Author(s)
      Kazuhiro Kikuchi, Michiko Nakai, Nguyen Viet Linh, Fuminori Tanihara, Naomi Kashiwazaki, Hiroyuki Kaneko, Junko Noguchi, Noboru Manabe
    • Organizer
      The 2nd World Congress on Reproductive Biology
    • Place of Presentation
      Cairns, Australia
    • Year and Date
      2011-10-10
  • [Presentation] ウシにおける大麦搗精粕とそれ由来リグニン配糖体の免疫賦活効果2011

    • Author(s)
      小野山一郎, 辻亮平, 藤原大介, 李俊佑, 眞鍋昇
    • Organizer
      第152回日本獣医学会
    • Place of Presentation
      大阪(大阪府立大学)
    • Year and Date
      2011-09-20
  • [Presentation] BidとBaxはブタ顆粒層細胞アポトーシスに関与しており,発現を阻害するとアポトーシス率が低下する2011

    • Author(s)
      眞鍋昇, 才貴史, 松田二子, 井上直子, 小野山一郎, 東福望, 後藤康文
    • Organizer
      第104回日本繁殖学会
    • Place of Presentation
      盛岡(岩手大学)
    • Year and Date
      2011-09-16
  • [Presentation] 卵胞顆粒層細胞におけるアポトーシス関連因子発現へのグレリンの影響2011

    • Author(s)
      東福望, 後藤康文, 高紅梅, 小野山一郎, 朴春香, 李俊佑, 眞鍋昇
    • Organizer
      第104回日本繁殖学会
    • Place of Presentation
      盛岡(岩手大学)
    • Year and Date
      2011-09-16
  • [Presentation] 体外発生培地へのL-カルニチン添加がウシ体外受精胚の発育および品質に及ぼす影響2011

    • Author(s)
      高橋利清, 稲葉泰志, ソムファイ タマス, 下司雅也, 永井卓, 眞鍋昇
    • Organizer
      第104回日本繁殖学会
    • Place of Presentation
      盛岡(岩手大学)
    • Year and Date
      2011-09-16
  • [Presentation] Contribution of fusion of ooplasmic fragments to the developmental ability of porcine denuded oocytes2011

    • Author(s)
      Nguyen Viet Linhl, Kazuhiro Kikuchi, Thanh Quang Dang Nguyen, Tamas Somfai, Bui Xuan Nguyen, Takashi Nagai, Noboru Manabe
    • Organizer
      第104回日本繁殖学会
    • Place of Presentation
      盛岡(岩手大学)
    • Year and Date
      2011-09-16
  • [Presentation] 好気性超高温発酵菌叢を用いた家畜糞尿処理における微生物群集の構造解析2011

    • Author(s)
      朴春香, 李俊佑, 高橋友継, 入江猛, 東福望, 大島泰郎, 山村正一, 眞鍋昇
    • Organizer
      第10回日本畜産環境学会
    • Place of Presentation
      東京(明治大学)
    • Year and Date
      2011-09-02
  • [Presentation] 好気性超高温発酵菌叢を用いた農畜産廃棄物処理技術の実用化2011

    • Author(s)
      高橋友継, 入江猛, 朴春香, 李俊佑, 大島泰郎, 山村正一, 眞鍋昇
    • Organizer
      第10回日本畜産環境学会
    • Place of Presentation
      東京(明治大学)
    • Year and Date
      2011-09-02
  • [Presentation] 囮受容体3は黄体の退行の制御因子のひとつである2011

    • Author(s)
      眞鍋昇, 小野山一郎, 高橋創, 後藤康文, 李俊佑, 奥田潔
    • Organizer
      第114回日本畜産学会
    • Place of Presentation
      十和田(北里大学)
    • Year and Date
      2011-08-26
  • [Presentation] 高度衛生管理のための家畜糞尿処理過程における好気性超高温発酵菌群集構造の変化2011

    • Author(s)
      朴春香, 李俊佑, 高橋友継, 入江猛, 大島泰郎, 山村正一, 眞鍋昇
    • Organizer
      第114回日本畜産学会
    • Place of Presentation
      十和田(北里大学)
    • Year and Date
      2011-08-26
  • [Presentation] 好気性超高温発酵菌叢を用いた家畜糞尿処理における通気環境と発酵温度との関係2011

    • Author(s)
      高橋友継, 入江猛, 朴春香, 李俊佑, 大島泰郎, 山村正一, 眞鍋昇
    • Organizer
      第114回日本畜産学会
    • Place of Presentation
      十和田(北里大学)
    • Year and Date
      2011-08-26
  • [Presentation] 家畜生殖細胞の保存と個体復元に関する研究開発動向2011

    • Author(s)
      眞鍋昇
    • Organizer
      日本学術会議シンポジウム
    • Place of Presentation
      白河(日本学術会議)(招待講演)
    • Year and Date
      2011-08-05
  • [Presentation] ガニアシによるがん細胞アポトーシス亢進における細胞死阻害因子の関与について2011

    • Author(s)
      眞鍋昇, 朴春香、Kannika Wongpanit, 杉本達芳, 綿貫孝一, 原耕三
    • Organizer
      第18回日本がん予防学会
    • Place of Presentation
      京都(京都府立大学)
    • Year and Date
      2011-06-20
  • [Presentation] 家畜防疫体制の再点検:昨年の口蹄疫対策の検証を踏まえて2011

    • Author(s)
      眞鍋昇
    • Organizer
      茨城県畜産研究会
    • Place of Presentation
      石岡(茨城大学)(招待講演)
    • Year and Date
      2011-06-14
  • [Book] 獣医組織学第5版・第14章雌性生殖器官2011

    • Author(s)
      眞鍋昇, 木村順平, 大塚沙織
    • Total Pages
      361
    • Publisher
      学窓社
  • [Book] 新動物生殖学・第7章卵子(卵胞)形成と雌の性周期2011

    • Author(s)
      宮野隆
    • Total Pages
      216
    • Publisher
      朝倉書店
  • [Book] 生物学辞典第5版2011

    • Author(s)
      眞鍋昇
    • Total Pages
      2837
    • Publisher
      岩波書店
  • [Book] 新動物生殖学2011

    • Author(s)
      眞鍋昇
    • Total Pages
      216
    • Publisher
      学窓社
  • [Book] 卵子学・第4章顆粒層細胞アポトーシスの分子機構2011

    • Author(s)
      眞鍋昇, 松田二子
    • Total Pages
      1195
    • Publisher
      京都大学出版会
  • [Remarks]

    • URL

      http://park.itc.u-tokyo.ac.jp/bokujo/

URL: 

Published: 2013-06-26  

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