| Research Abstract |
本研究の目的は,難治性呼吸器疾患に対して,粉末製剤化した核酸あるいは分子標的薬を経気道的に疾患肺へ導入することで,標的となる遺伝子や分子の発現や機能を抑制することが可能か,そして,この治療的介入が病態の進展阻止につながるのかどうかを検証することである.昨年度は,麻酔下にてマウスに対する経口挿管を行い,粉末化siRNAを経気道投与する手法の開発,キトサンをカチオン性ベクターとして,超臨界二酸化炭素晶析法及び噴霧乾燥法を用いてGFP-siRNAの粉末製剤化に成功した.これらの手法を使用して,昨年度に引き続き,Green fluorescence protein(GFP)を全身の細胞に発現しているGFPトランスジェニックマウスに対して,粉末製剤化したGFPに対するsiRNA(GFP-siRNA)の気道投与する実験を行い,GFPの発現がどの部位で抑制されるのかを検証した.蛍光顕微鏡下での観察にて,GFP-siRNA投与群では,コントロールsiRNA投与群に比して,視覚的に明らかな中-細気管支レベルでのGFPによる蛍光強度の低下を認めた.組織内の蛍光強度の定量化も行い,統計的に有意差をもって,GFP-siRNA投与群におけるGFPの蛍光強度の低下を証明することが出来た.この結果により,粉末化したsiRNAの経気道投与が,マウスの気道における遺伝子ノックダウンに有用であることが示されたと考える.
さらに,GFPを恒常的に発現しているLewis lung carcinoma(LLC)細胞(GFP-LLC)をマウスへの尾静脈投与により,肺内にGFPの蛍光を発する多発性の腫瘍が発生するが,そのマウスへ粉末化したGFP-siRNAを経気道投与することで,腫瘍内の蛍光強度が低下することも明らかとなった.この結果により,肺内腫瘍における遺伝子ノックダウンにも,粉末化したsiRNAの経気道投与が有用である可能性が示された.
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
粉末化したsiRNAの経気道投与により,マウスの気道,さらには腫瘍病変における遺伝子のノックダウンを惹起できることを示すことができ,当初の計画通りに進んでいるから.
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