2011 Fiscal Year Annual Research Report
前立腺特異抗原を凌駕する糖鎖標的前立腺癌診断ツールの開発と臨床応用
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22390301
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
大山 力 弘前大学, 医学研究科, 教授 (80282135)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
羽渕 友則 秋田大学, 大学院・医学研究科, 教授 (00293861)
神村 典孝 弘前大学, 大学院・医学研究科, 准教授 (00281931)
古家 琢也 弘前大学, 医学部附属病院, 講師 (60321965)
盛 和行 弘前大学, 大学院・医学研究科, 助教 (40266903)
坪井 滋 弘前大学, 大学院・医学研究科, 研究員 (20526727)
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| Keywords | 前立腺癌 / 前立腺特異抗原 / 糖鎖 / マーカー |
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| Research Abstract |
本年度は、前立腺癌の過剰診断を克服する診断マーカーの開発を目的として前立腺癌特異的Siaα2,3Gal糖鎖を持つfreePSAアッセイ系の構築を目標とした。まず、蛍光ビーズと糖鎖特異的抗体からなるSiaα2,3Gal-freePSAアッセイ系を構築した。次に、本アッセイ系を用いて前立腺癌および前立腺肥大症患者血清のSiaα2,3Gal-frePSA含有量を測定し、両者を比較した。その結果、従来のPSA検査で前立腺癌の疑いがあると判断された患者で針生検によって良性疾患と診断された患者のうち約75.5%の患者について針生検が不要と判定可能であった。以上より、本アッセイ系は従来法よりも特異度が高いことが示唆された。
本システムを臨床応用する上で以下の2点のツール開発を実施した。
(1)Luminexビーズへの抗FreePSA抗体の固定化
Luminexビーズへの抗FreePSA抗体の固定化は、xMAP Antibody Coupling Kitのマニュアルに従って実施した。6.25×10^6個/500μLのMagPlex Microspheresに5mg/mLの抗freePSA抗体を固定化した。
(2)糖鎖をキャプチャーするレクチンの大量生産
レクチンは、大腸菌における組み替えタンパク質の大量生産が困難であったため、MAAレクチンの代替品として大量生産可能な抗Siaα2,3Galモノクローナル抗体(HYB4)を用いた。本抗体は、静岡県立大学 薬学部 生化学分野 左一八 准教授が開発し、分与されたものである。本測定系を含め、抗体情報とともに特許出願準備中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
前立腺特異抗原の癌性変化を感知できるモノクローナル抗体を見出し、PSA濃度が4-20ng/m1のレベルでも前立腺癌と良性疾患を感度0.8354、特異度0.7083で鑑別できるアッセイ系を開発したから。
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| Strategy for Future Research Activity |
さらに検体数を増やして、200例程度の症例で検討を加える。次年度は、前向き研究の研究計画を立案し大規模臨床試験への足掛かりとする。研究計画を変更する必要はない。
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