エンドサートーシス制御を基盤とした新しい感染制御法の開発

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22390354
• Research Institution: National Center for Geriatrics and Gerontology
• Principal Investigator: 松下 健二 独立行政法人国立長寿医療研究センター, 口腔疾患研究部, 部長 (90253898)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 萩原 真 独立行政法人国立長寿医療研究センター, 口腔疾患研究部, 流動研究員 (30546099)
• Keywords: エンドサイトーシス / 歯周病 / Porphyromonas gingivalis / Rab5 / 歯肉上皮細胞 / 慢性炎症 / 持続感染

Research Abstract

【目的】歯周病関連細菌 Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis)が細胞内へ侵入することにより,様々な細胞機能傷害等を引き起こすことが報告されている。しかし,詳細な細胞内侵入メカニズムは明らかにされていない。細菌の侵入経路としてはエンドサイトーシスがあり,その早期経路において低分子Gタンパク質のRab5は重要な制御因子として知られている。Rab5には活性型と不活性型が存在し,この活性変化により高度にエンドサイトーシスが制御されている。そこで本研究では,Rab5に着目し,歯肉上皮細胞内への P. gingivalis の侵入機構を検討した。
【材料および方法】GFP-Rab5(Q79L : 活性型Rab5)及び,GFP-Rab5(S34N : 不活性型Rab5)を発現させた歯肉上皮癌細胞(Ca9-22 細胞)を作製した。Ca9-22 細胞とP. gingivalis ATCC 33277株を共培養した。その後,蛍光免疫染色によりRab5とP. gingivalisの細胞内局在を観察した。また上記共培養後,塗抹法により細胞内へ侵入したP. gingivalisの菌数を定量した。
【結果および考察】活性型Rab5を発現させたCa9-22 細胞では,P. gingivalisとRab5の共局在を認めた。一方,不活性型Rab5を発現させたCa9-22 細胞ではRab5とP. gingivalisの共局在は認められなかった。また,塗抹法により細胞内に侵入した菌数を比較したところ,活性型Rab5を発現させた細胞では,不活性型Rab5を発現させた細胞に比べ菌数が多かった。以上の結果から,Rab5は,P. gingivalisの歯肉上皮細胞への侵入に関与していることが示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Plasminogen/plasmin modulates bone metabolism by regulating the osteoblast and osteoclast function (2011)
  • Author(s): Kanno Y, Ishisaki A, Nakajima K, Nishihara T, Toyoshima T, Okada K, Ueshima S, Matsushita K, Matsuo O, Matsuno H
  • Journal Title: J Biol Chem Volume: 286 Pages: 8952-8960
  • DOI: 10.1074/jcb.M110.152181
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Complete pulp regeneration after pulpectomy by transplantation of CD 105^+ stem cells with SDF-1 (2011)
  • Author(s): ohara K, Imabayashi K, Ishizaka R, Watanabe A, Nabekura J, Ito M, Matsushita K, Nakamura H, Nakashima M
  • Journal Title: Tissue Eng Part A Volume: 17 Pages: 1911-1920
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dental Pulp-Derived CD31(-)/CD146(-) Side Population Stem/Progenitor Cells Enhance Recovery of Focal Cerebral Ischemia in Rats (2011)
  • Author(s): Sugiyama M, Iohara K, Wakita H, Hattori H, Ueda M, Matsushita K, Nakashima M
  • Journal Title: Tissue Eng Part A Volume: 17 Pages: 1303-1311
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Morroniside cinnamic acid conjugate as an anti-inflammatoryagent (2011)
  • Author(s): Takeda Y, Tanigawa N, Sunghwa F, Ninomiya M, Hagiwara M, Matsushita K, Koketsu M
  • Journal Title: J Biol Chem Volume: 20 Pages: 4855-4857
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] P Valproic acid increases susceptibility to endotoxin shock through enhanced release of HMGB (2011)
  • Author(s): Sugiura S, Ishihara Y, Komatsu T, Hagiwara M, Tanigawa N, Kato Y, Mizutani H, Kawahara K, Maruyama I, Noguchi T, Matsushita K
  • Journal Title: Shock Volume: (印刷中)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 高齢者住民における保有歯数と認知機能 (2010)
  • Author(s): 今井剛、西永正典、中村知子、奥宮清人, 松林公蔵、土居義典、松下健二
  • Journal Title: 愛院大歯誌 Volume: 48 Pages: 59-66
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Morroniside derivative regulates E-selectin expression in human endothelial cells (2011)
  • Author(s): Tanigawa N, Takeda Y, Sunghwa F, Ninomiya M, Hagiwara M, Koketsu M, Matsushita K
  • Organizer: The 4th International Symposium for Interface Oral Health Science
  • Place of Presentation: Sendai, Miyagi, Japan
  • Year and Date: 2011-03-07
• [Presentation] バルプロ酸はHMGB1の能動放出を誘導して、エンドトキシンショックに対する感受性を高める (2010)
  • Author(s): 杉浦進介, 石原裕一, 小松寿明, 萩原真, 谷川順美, 水谷大樹, 加藤佳子, 江口傑徳, 野口俊英, 松下健二
  • Organizer: 第16回日本エンドトキシン・自然免疫研究会
  • Place of Presentation: 奈良
  • Year and Date: 2010-11-13
• [Presentation] E-selectin mediates Porphyromonas gingivalis adherence to endothelial cells (2010)
  • Author(s): Komatsu T, Nagano K, Sugiura S, Hagiwara M, Tanigawa N, Eguchi T, Yoshimura F, Furuichi Y, Matsushita K
  • Organizer: The 96th Annual Meeting of American Academy of Periodontology
  • Place of Presentation: Honolulu, HI, USA
  • Year and Date: 2010-10-31
• [Presentation] Valproic acid enhances innate immune response to LPS by HMGB1 release (2010)
  • Author(s): Sugiura S, Ishihara Y, Komatsu T, Hagiwara M, Tanigawa N, Eguchi T, Mizutani H, Matsushita K, Noguchi T
  • Organizer: The 96th Annual Meeting of American Academy of Periodontology
  • Place of Presentation: Honolulu, HI, USA
  • Year and Date: 2010-10-31
• [Presentation] オーラルヘルスプロモーションのこれから-口腔健康行動におけるコミュニティーチーム医療- (2010)
  • Author(s): 松下健二
  • Organizer: 日本健康心理学会
  • Place of Presentation: 千葉
  • Year and Date: 2010-09-11
• [Presentation] E-selectin mediates Porphyromonas gingivalis adherence to endothelial cells (2010)
  • Author(s): Komatsu T, Nagano K, Sugiura S, Hagiwara M, Tanigawa N, Eguchi T, Yoshimura F, Furuichi Y, Matsushita K
  • Organizer: 第8回血液・血管オルビス
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2010-08-21
• [Presentation] Valproic acid enhanced innate immune response induced by LPS through stimulating active release of HMGB1 (2010)
  • Author(s): Sugiura S, Ishihara Y, Komatsu T, Hagiwara M, Tanigawa N, Mizutani H, Eguchi T, Kawahara K, Maruyama I, Noguchi T, Matsushita K
  • Organizer: 第8回血液・血管オルビス
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2010-08-21
• [Presentation] 歯髄幹細胞を用いた抜髄後歯髄再生のタンパク化学的解析による証明 (2010)
  • Author(s): 今林貴代美、庵原耕一郎、石坂亮、江波久哲、松下健二、中村洋、中島美砂子
  • Organizer: 第132回日本歯科保存学会春季学術大会
  • Place of Presentation: 熊本
  • Year and Date: 2010-06-05
• [Presentation] 歯髄CD105陽性細胞を用いた抜髄後歯髄再生法の確立 (2010)
  • Author(s): 庵原耕一郎、石坂亮、今林貴代美、江場久哲、松下健二、中村洋、中島美砂子
  • Organizer: 第132回日本歯科保存学会春季学術大会
  • Place of Presentation: 熊本
  • Year and Date: 2010-06-05
• [Presentation] MMP-3はイヌ一部性歯髄炎モデルにおいて歯髄治癒を促進する (2010)
  • Author(s): 江場久哲、中島美砂子、庵原耕一郎、松下健二、中田和彦、中村洋
  • Organizer: 第132回日本歯科保存学会春季学術大会
  • Place of Presentation: 熊本
  • Year and Date: 2010-06-05
• [Presentation] バルプロ酸(VPA)はERK1/2の活性化を介してHigh Mobility Group Box 1 (HMGB1)の産生を誘導する (2010)
  • Author(s): 杉浦進介、江口傑徳、萩原真、小松寿明、谷川順美、野口俊英、松下健二
  • Organizer: 第33回日本血栓止血学会学術集会
  • Place of Presentation: 鹿児島
  • Year and Date: 2010-04-24
• [Presentation] Angiotensin II Activates Endothelial Exocytosis by Stimulating Superoxide Production (2010)
  • Author(s): Matsushita K, Morrell CN, Mason, EL O'Rourke B, Champion HC, Lowenstein CJ
  • Organizer: 第33回日本血栓止血学会学術集会
  • Place of Presentation: 鹿児島
  • Year and Date: 2010-04-24
• [Presentation] 凝固第Xa因子の病態への関与とその制御-基礎研究者の立場から (2010)
  • Author(s): 松下健二
  • Organizer: 第3回Bayer Thrombosis Seminar
  • Place of Presentation: 鹿児島
  • Year and Date: 2010-04-22
• [Book] Oral Health Science (2011)
  • Author(s): Tanigawa N, Takeda Y, Sunghwa F, Ninomiya M, Hagiwara M, Koketsu M, Matsushita K
  • Publisher: Morroniside derivative regulates E-selectin expression in human endothelial cells(印刷中)
• [Book] エンドトキシン研究14 (2011)
  • Author(s): T杉浦進介, 石原裕一, 小松寿明, 萩原真, 水谷大樹, 加藤佳子, 野口俊英, 松下健二
  • Publisher: バルプロ酸はHMGB1の能動放出を誘導して、エンドトキシンショックに対する感受性を高める(印刷中)
• [Book] The Bone (2011)
  • Author(s): 松下健二
  • Publisher: 歯周病と炎症(印刷中)
• [Remarks]
  • URL: http://www.ncgg.go.jp/denartment/odr/index.html