2010 Fiscal Year Annual Research Report
細胞接着・細胞運動制御に関与するネクチン様分子の構造生物学的研究
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22570115
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
鈴木 守 大阪大学, 蛋白質研究所, 准教授 (40280507)
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| Keywords | 構造生物学 / X線結晶学 |
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| Research Abstract |
細胞接着(アドヘレンスジャンクション、タイトジャンクション、デスモソーム、ギャップジャンクション)は細胞と細胞との間に作られ、これらは互いに相互作用している。細胞接着は、組織や臓器の形成に必須であると共に、その異常はがんなど多くの疾患の原因になっている。
細胞接着の開始は、増殖しながら運動している細胞同士が衝突して接触することにより行われる。細胞の増殖と運動を促進するネクチン様分子(Necl)が細胞の運動先導端において、細胞接着分子ネクチンとが相互作用することにより細胞の増殖と運動が停止され、ネクチンとカドヘリンによるアドヘレンスジャンクションが形成され、続いてクローディンによるタイトジャンクションが形成される。
ネクチン様分子(Necl)は5つのメンバーからなるファミリーを形成している。Neclは1回膜貫通型の蛋白質あり、N末端が細胞外を向いており、3つの免疫グロブリン(以下、Ig)フォールド(V-set、C2-set、C2-set)で構成されている。Neclはネクチンと同じ分子構造を取っているが、1次配列の相同性は20%と低く、さらにC末端にアファディン結合配列が無いためアクチン細胞骨格と連結しないという点がネクチンと異なる。課題代表者がすでに構造解析に成功しているネクチン1に加え、Neclファミリーの構造が明らかになれば、細胞表面での接着、運動制御のメカニズムを立体構造に立脚して議論できると考えている。
今年度は、独立行政法人製品評価技術基盤機構より分譲を受けた遺伝子を用い、大腸菌発現系を用いたヒト由来のNecl-1～5の細胞外領域の発現確認を行った。すでに着手していたネクチンの場合と同様、どれも可溶性画分には得られないことが明らかになった。そこで、封入体としての精製法および、大希釈法による巻き戻し条件の検討を行った。
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[Journal Article] Refolding, crystallization and preliminary X-ray crystallographic study of the whole extracellular regions of nectins2011
Author(s)
Narita, H., Nakagawa, A., Yamamoto, Y., Sakisaka, T., Takai, Y., Suzuki.M.
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Journal Title
Acta Crystallographica Section F
Volume: 67
Pages: 344-348
Peer Reviewed
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[Journal Article] Crystal structure of the cis-dimer of nectin-1 : Implications for the architecture of cell-cell junctions2011
Author(s)
Narita, H., Yamamoto, Y., Suzuki.M., Miyazaki, N., Yoshida, A., Kawai, K., Iwasaki, K., Nakagawa, A., Takai, Y., Sakisaka, T.
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Journal Title
The Journal of Biological Chemistry
Volume: 41(online)
Peer Reviewed
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