2010 Fiscal Year Annual Research Report
赤かび病菌のストレス応答シグナル伝達経路によるトリコテセン合成制御機構の解明
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22580054
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| Research Institution | Toyo University |
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Principal Investigator |
藤村 真 東洋大学, 生命科学部, 教授 (50297735)
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| Keywords | 赤かび病 / トリコテセン / ストレス応答 / MAPキナーゼ / アカパンカビ |
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| Research Abstract |
麦類赤かび病菌のストレス応答とカビ毒(トリコテセン)合成制御の関係を明らかにするために、当初計画に基づき研究を展開し、下記の成果を得た。
1、CREB型転写因子FgATF1破壊株の作成とトリコテセン合成能
赤かび病菌のストレス応答MAPキナーゼFgOS2遺伝子の欠損株は、トリコテセン合成能を失う。一方、アカパンカビのMAPキナーゼOS-2の主要な転写因子は、ATF-1であることを報告している。そこで、本年度は、赤かび病菌のFgATP1遺伝子を相同組み換え法により破壊した。ΔFgATF1株のトリコテセン合成能を調べたところ、野生株と同等のトリコテセンがTLCにより検出された。このことから、FgATF1はトリコテセン合成に直接関与しないことが明らかになった。
2、FgOS2のリン酸化解析
MAPキナーゼはリン酸化により活性化される。そこで、抗リン酸化抗体を用いてウエスタン法によりFgOS2のリン酸化の有無を解析した。その結果、フルジオキソニル処理により顕著にリン酸化されることが明らかになった。
3、かび病菌のFgOS2依存的にフルジオキソニルにより誘導される遺伝子群の同定
アカパンカビのOS-2により制御される遺伝子群のオルソログを検索し、赤かび病菌でも同様に誘導されるかを、リアルタイムPCR法により解析した。その結果、FgCAT1、FgGCY1、FgCCG1などの遺伝子群がフルジオキソニル処理により、FgOS2依存的に誘導されることが明らかになった。ただし、例外遺伝子も存在した。
4、糸状菌のストレス応答MAPキナーゼにより制御される転写因子の同定
FgATF1がトリコテセン合成に関与しなかったことから、FgOS2により制御される新たな転写因子を探索する必要がある。そこで、本年度は、アカパンカビを用いて、OS2に結合するタンパク質をアフィニティ精製しTOF-MASS解析により、RCO-1を同定した。今後、赤かび病菌のFgRCO1がトリコテセン合成に関与するかを検証する。
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